光親和标記英文解釋翻譯、光親和标記的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 photoaffinity labeling
分詞翻譯:
光的英語翻譯:
light; ray; honour; merely; naked; scenery; smooth
【化】 light
【醫】 light; phot-; photo-
親的英語翻譯:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英語翻譯:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【計】 ampersand
【醫】 c.; cum
标記的英語翻譯:
mark; sign; symbol; badge; earmark; tag
【計】 badge; benchmarking; F; L; labelling; marker; sentinel; tag; tagging
【化】 code; mark; marks; stamping; tag; tagging
【醫】 labelling; Sig.; signa; signature; symbol
【經】 mark; marking
專業解析
光親和标記(Photoaffinity Labeling)是一種在化學生物學和藥物研發中用于研究生物分子相互作用的關鍵技術。其核心原理是利用光激活的生物活性分子探針,與靶标分子(如蛋白質、核酸)發生特異性、不可逆的共價結合,從而實現對靶标的高效識别與标記。
一、漢英術語解析
- 中文全稱:光親和标記
- 英文全稱:Photoaffinity Labeling
- 核心概念:
- 光激活 (Photoactivation):探針攜帶的光敏基團(如芳基疊氮化物、二苯甲酮)在特定波長光照下被激發,生成高反應活性的中間體(如氮賓、自由基)。
- 親和結合 (Affinity Binding):探針通過其生物活性部分(如配體、底物類似物)預先與靶标分子的結合位點進行特異性、可逆結合。
- 共價标記 (Covalent Labeling):光生活性中間體與鄰近的靶标分子發生共價鍵合,形成穩定的加合物,實現永久性标記。
二、技術原理與流程
- 探針設計:合成包含三部分的分子探針:
- 生物活性基團:确保與靶标特異性結合(如酶抑制劑、受體激動劑/拮抗劑)。
- 光敏基團:在光照下産生活性物種(常用芳基疊氮 -aryl azide、二苯甲酮 -benzophenone)。
- 報告/富集團:便于後續檢測或純化(如熒光基團、生物素 -biotin、點擊化學手柄)。
- 孵育結合:探針在避光條件下與生物樣本(細胞裂解液、純化蛋白、活細胞)孵育,通過親和力結合到靶标位點。
- 光照激活:用特定波長(常為UV光)照射,激活光敏基團,産生活性中間體。
- 共價交聯:活性中間體攻擊鄰近的靶标分子(通常是氨基酸側鍊),形成共價鍵。
- 檢測與分析:通過凝膠電泳、質譜、顯微成像等技術檢測标記的靶标,進行鑒定、定位或定量研究。
三、核心優勢與應用
- 捕獲瞬時/弱相互作用:傳統方法難以捕捉的短暫或低親和力相互作用可被“鎖定”研究。來源:《自然·化學生物學評論》(Nature Reviews Chemical Biology)
- 高特異性标記:基于親和力的預結合大幅提高标記特異性,降低背景噪音。來源:《生物化學年度評論》(Annual Review of Biochemistry)
- 靶點識别與驗證:藥物研發中用于鑒定藥物靶點、結合位點及脫靶效應。來源:《藥物化學雜志》(Journal of Medicinal Chemistry)
- 相互作用網絡研究:繪制蛋白質-蛋白質、蛋白質-核酸、蛋白質-小分子相互作用圖譜。來源:《細胞化學生物學》(Cell Chemical Biology)
- 活細胞原位研究:適用于複雜生理環境下的動态過程研究(需細胞滲透性探針)。來源:《美國國家科學院院刊》(PNAS)
四、關鍵光敏基團對比
光敏基團 |
英文名 |
活化波長 |
活性中間體 |
特點 |
芳基疊氮化物 |
Aryl Azide |
~254-350 nm |
氮賓 (Nitrene) |
小尺寸,反應性強;可能副反應多 |
二苯甲酮 |
Benzophenone |
~350-365 nm |
三線态雙自由基 |
穩定性高,偏好C-H鍵插入;背景較低 |
重氮化合物 |
Diazirine |
~350-380 nm |
卡賓 (Carbene) |
小尺寸,高反應性,細胞滲透性好 |
五、參考文獻(權威來源)
- 技術原理綜述:Dorman, G., & Prestwich, G. D. (1994). Benzophenone Photophores in Biochemistry. Biochemistry, 33(19), 5661–5673. 來源:美國化學會 (ACS Publications)
- 應用與進展:Hatanaka, Y., & Sadakane, Y. (2002). Photoaffinity Labeling in Drug Discovery and Developments: Chemical Gateway for Entering Proteomic Frontier. Current Topics in Medicinal Chemistry, 2(3), 271–288. 來源:Bentham Science Publishers
- 活細胞标記:Tate, E. W., et al. (2015). Global Profiling of Protein Lipidation Using Chemical Proteomic Technologies. Current Opinion in Chemical Biology, 24, 48–57. 來源:Elsevier (Cell Press)
- 經典方法指南:Fleming, S. A. (1995). Chemical Reagents in Photoaffinity Labeling. Tetrahedron, 51(46), 12479–12520. 來源:Elsevier
網絡擴展解釋
光親和标記(Photoaffinity Labeling)是一種結合光化學反應與親和标記的生物分子研究技術,主要用于特異性标記目标分子(如蛋白質、受體等)的結合位點。以下是其核心要點:
一、定義與基本原理
-
定義
光親和标記通過光敏基團(如疊氮基)與親和配體結合,在光照下形成共價鍵,實現對目标分子的特異性标記。它結合了親和标記的靶向性和光激活的共價結合特性。
-
作用機制
- 親和結合:标記試劑(R-P)中的R基團與目标分子(如受體、酶)的活性部位特異性結合。
- 光激活:在特定波長(如365 nm紫外線)照射下,P基團(光敏基團)被激活,生成高活性中間體(如碳卡賓、自由基),與周圍分子快速形成共價鍵。
- 共價标記:最終在結合位點形成穩定的共價連接,實現不可逆标記。
二、技術特點
- 高特異性:依賴親和配體的靶向結合,減少非特異性标記。
- 時空可控:光激活步驟可精确控制反應時機與位置。
- 短壽命中間體:光敏基團激活後壽命極短(微秒級),僅在結合位點附近反應,提高标記準确性。
三、應用領域
- 受體-配體相互作用研究
用于解析藥物、激素等配體與受體的結合位點,如苯二氮䓬受體的标記研究。
- 藥物靶點發現
通過光親和探針識别小分子藥物的靶蛋白,揭示作用機制。
- 蛋白質組學
标記特定功能蛋白,輔助蛋白質互作網絡分析。
四、與傳統親和标記的區别
傳統親和标記依賴化學反應基團直接修飾目标分子,可能因非特異性結合導緻誤差;光親和标記通過光控激活,僅在靶點附近反應,特異性更高。
如需進一步了解技術細節或具體案例,可參考中國知網文獻及光活化探針相關研究。
分類
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