光亲和标记英文解释翻译、光亲和标记的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 photoaffinity labeling
分词翻译:
光的英语翻译:
light; ray; honour; merely; naked; scenery; smooth
【化】 light
【医】 light; phot-; photo-
亲的英语翻译:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英语翻译:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【计】 ampersand
【医】 c.; cum
标记的英语翻译:
mark; sign; symbol; badge; earmark; tag
【计】 badge; benchmarking; F; L; labelling; marker; sentinel; tag; tagging
【化】 code; mark; marks; stamping; tag; tagging
【医】 labelling; Sig.; signa; signature; symbol
【经】 mark; marking
专业解析
光亲和标记(Photoaffinity Labeling)是一种在化学生物学和药物研发中用于研究生物分子相互作用的关键技术。其核心原理是利用光激活的生物活性分子探针,与靶标分子(如蛋白质、核酸)发生特异性、不可逆的共价结合,从而实现对靶标的高效识别与标记。
一、汉英术语解析
- 中文全称:光亲和标记
- 英文全称:Photoaffinity Labeling
- 核心概念:
- 光激活 (Photoactivation):探针携带的光敏基团(如芳基叠氮化物、二苯甲酮)在特定波长光照下被激发,生成高反应活性的中间体(如氮宾、自由基)。
- 亲和结合 (Affinity Binding):探针通过其生物活性部分(如配体、底物类似物)预先与靶标分子的结合位点进行特异性、可逆结合。
- 共价标记 (Covalent Labeling):光生活性中间体与邻近的靶标分子发生共价键合,形成稳定的加合物,实现永久性标记。
二、技术原理与流程
- 探针设计:合成包含三部分的分子探针:
- 生物活性基团:确保与靶标特异性结合(如酶抑制剂、受体激动剂/拮抗剂)。
- 光敏基团:在光照下产生活性物种(常用芳基叠氮 -aryl azide、二苯甲酮 -benzophenone)。
- 报告/富集团:便于后续检测或纯化(如荧光基团、生物素 -biotin、点击化学手柄)。
- 孵育结合:探针在避光条件下与生物样本(细胞裂解液、纯化蛋白、活细胞)孵育,通过亲和力结合到靶标位点。
- 光照激活:用特定波长(常为UV光)照射,激活光敏基团,产生活性中间体。
- 共价交联:活性中间体攻击邻近的靶标分子(通常是氨基酸侧链),形成共价键。
- 检测与分析:通过凝胶电泳、质谱、显微成像等技术检测标记的靶标,进行鉴定、定位或定量研究。
三、核心优势与应用
- 捕获瞬时/弱相互作用:传统方法难以捕捉的短暂或低亲和力相互作用可被“锁定”研究。来源:《自然·化学生物学评论》(Nature Reviews Chemical Biology)
- 高特异性标记:基于亲和力的预结合大幅提高标记特异性,降低背景噪音。来源:《生物化学年度评论》(Annual Review of Biochemistry)
- 靶点识别与验证:药物研发中用于鉴定药物靶点、结合位点及脱靶效应。来源:《药物化学杂志》(Journal of Medicinal Chemistry)
- 相互作用网络研究:绘制蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸、蛋白质-小分子相互作用图谱。来源:《细胞化学生物学》(Cell Chemical Biology)
- 活细胞原位研究:适用于复杂生理环境下的动态过程研究(需细胞渗透性探针)。来源:《美国国家科学院院刊》(PNAS)
四、关键光敏基团对比
光敏基团 |
英文名 |
活化波长 |
活性中间体 |
特点 |
芳基叠氮化物 |
Aryl Azide |
~254-350 nm |
氮宾 (Nitrene) |
小尺寸,反应性强;可能副反应多 |
二苯甲酮 |
Benzophenone |
~350-365 nm |
三线态双自由基 |
稳定性高,偏好C-H键插入;背景较低 |
重氮化合物 |
Diazirine |
~350-380 nm |
卡宾 (Carbene) |
小尺寸,高反应性,细胞渗透性好 |
五、参考文献(权威来源)
- 技术原理综述:Dorman, G., & Prestwich, G. D. (1994). Benzophenone Photophores in Biochemistry. Biochemistry, 33(19), 5661–5673. 来源:美国化学会 (ACS Publications)
- 应用与进展:Hatanaka, Y., & Sadakane, Y. (2002). Photoaffinity Labeling in Drug Discovery and Developments: Chemical Gateway for Entering Proteomic Frontier. Current Topics in Medicinal Chemistry, 2(3), 271–288. 来源:Bentham Science Publishers
- 活细胞标记:Tate, E. W., et al. (2015). Global Profiling of Protein Lipidation Using Chemical Proteomic Technologies. Current Opinion in Chemical Biology, 24, 48–57. 来源:Elsevier (Cell Press)
- 经典方法指南:Fleming, S. A. (1995). Chemical Reagents in Photoaffinity Labeling. Tetrahedron, 51(46), 12479–12520. 来源:Elsevier
网络扩展解释
光亲和标记(Photoaffinity Labeling)是一种结合光化学反应与亲和标记的生物分子研究技术,主要用于特异性标记目标分子(如蛋白质、受体等)的结合位点。以下是其核心要点:
一、定义与基本原理
-
定义
光亲和标记通过光敏基团(如叠氮基)与亲和配体结合,在光照下形成共价键,实现对目标分子的特异性标记。它结合了亲和标记的靶向性和光激活的共价结合特性。
-
作用机制
- 亲和结合:标记试剂(R-P)中的R基团与目标分子(如受体、酶)的活性部位特异性结合。
- 光激活:在特定波长(如365 nm紫外线)照射下,P基团(光敏基团)被激活,生成高活性中间体(如碳卡宾、自由基),与周围分子快速形成共价键。
- 共价标记:最终在结合位点形成稳定的共价连接,实现不可逆标记。
二、技术特点
- 高特异性:依赖亲和配体的靶向结合,减少非特异性标记。
- 时空可控:光激活步骤可精确控制反应时机与位置。
- 短寿命中间体:光敏基团激活后寿命极短(微秒级),仅在结合位点附近反应,提高标记准确性。
三、应用领域
- 受体-配体相互作用研究
用于解析药物、激素等配体与受体的结合位点,如苯二氮䓬受体的标记研究。
- 药物靶点发现
通过光亲和探针识别小分子药物的靶蛋白,揭示作用机制。
- 蛋白质组学
标记特定功能蛋白,辅助蛋白质互作网络分析。
四、与传统亲和标记的区别
传统亲和标记依赖化学反应基团直接修饰目标分子,可能因非特异性结合导致误差;光亲和标记通过光控激活,仅在靶点附近反应,特异性更高。
如需进一步了解技术细节或具体案例,可参考中国知网文献及光活化探针相关研究。
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