
【化】 heat inactivation (of enzyme)
热失活(Thermal Inactivation)是生物化学与工程学中的核心概念,指生物活性物质(如酶、蛋白质或微生物)因温度升高导致结构破坏、功能丧失的过程。该术语由“热”(thermal)和“失活”(inactivation)构成,其中“热”描述能量输入方式,“失活”强调生物活性的不可逆终止。
高温通过破坏氢键、疏水作用等非共价键,使蛋白质三级结构展开(变性),暴露出活性位点或导致构象改变。例如,酶的热失活常伴随活性中心的空间位阻增加,最终丧失催化能力。这一过程符合阿伦尼乌斯方程,失活速率与温度呈指数关系: $$ k = A cdot e^{-E_a/(RT)} $$ 其中$k$为失活速率常数,$E_a$为活化能。
国际生物化学联合会(IUBMB)建议采用差示扫描量热法(DSC)测定蛋白质热失活温度,相关测试方法收录于《酶学分析方法》第7版。美国药典USP<85>章节明确规定了生物制品热稳定性验证流程。
“热失活”是生物化学和分子生物学中的专业术语,指通过加热处理使生物活性物质(如酶、蛋白质等)失去原有功能或活性的过程。以下是详细解释:
定义与机制
热失活(Thermal inactivation)的核心原理是利用高温破坏生物大分子的结构(如蛋白质变性),导致其失去催化能力或其他生物活性。例如,实验中通过加热使CIP(可能指某种酶)活性下降,正是这一过程的体现。
应用场景
与其他失活方式的区别
提到实验中同时使用了EDTA脱锌失活和加锌复活方法,说明热失活可能与金属离子依赖性失活机制不同。前者依赖物理温度变化,后者可能涉及化学结合或结构修饰。
关键因素
可逆性
热失活通常是不可逆的,因为高温可能造成永久性结构破坏(如蛋白质展开后无法复性)。但部分情况下,若分子结构未完全破坏,可能通过特定条件(如辅因子补充)部分恢复活性。
如需进一步了解热失活的动力学模型或具体案例,可参考生物化学相关文献或实验手册。
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