双缩脲试剂英文解释翻译、双缩脲试剂的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【医】 biuret reagent
分词翻译:
双缩脲的英语翻译:
【医】 allophanamide; biuret
试剂的英语翻译:
reagent
【化】 reagent
【医】 agentia; reagent
专业解析
双缩脲试剂(Biuret Reagent)是一种在生物化学中用于检测蛋白质或多肽的常用化学试剂。其名称源于它能与具有两个或两个以上肽键(-CO-NH-)的物质发生反应,产生特征的紫色络合物,类似于双缩脲(H₂N-CO-NH-CO-NH₂)的反应,故得名“双缩脲反应”,相应的试剂称为双缩脲试剂。
详细解释:
-
化学成分:
- 双缩脲试剂主要由两种成分组成:
- 氢氧化钠 (NaOH): 提供强碱性环境(通常浓度约为10%),这是反应发生的必要条件。
- 硫酸铜 (CuSO₄): 提供铜离子(Cu²⁺),它是与肽键络合的核心离子(通常浓度较低,约为0.05%-0.5%)。
- 有时会加入酒石酸钾钠(如罗谢尔盐)作为稳定剂,防止碱性溶液中的铜离子形成氢氧化铜沉淀,确保试剂澄清且反应灵敏。
-
工作原理:
- 在碱性条件下,蛋白质或多肽分子中的肽键(-CO-NH-)的氮原子提供孤对电子,与铜离子(Cu²⁺)发生配位结合。
- 通常需要至少两个肽键(即至少含有三个氨基酸残基的肽链)才能形成稳定的、在可见光区有强吸收的紫色络合物(最大吸收波长约为540-560 nm)。
- 生成的络合物结构复杂,通常认为铜离子与四个肽键氮原子配位,形成类似双核铜中心的螯合结构。
- 反应式可简化为:
蛋白质/多肽(含≥2个肽键) + Cu²⁺ + OH⁻ → 紫色络合物
-
主要应用:
- 蛋白质定量分析: 这是双缩脲试剂最经典和主要的用途。生成的紫色络合物在540-560 nm处的吸光度与蛋白质浓度在一定范围内(通常1-10 mg/mL)呈线性关系,可用于测定溶液中蛋白质的总浓度。该方法操作简便、快速,且受蛋白质种类差异的影响相对较小(与Lowry法或BCA法相比)。
- 蛋白质定性检测: 通过观察溶液是否出现紫色或紫红色,可以初步判断样品中是否含有蛋白质或多肽。
汉英对照关键术语:
- 双缩脲试剂: Biuret Reagent
- 肽键: Peptide bond (-CO-NH-)
- 蛋白质: Protein
- 多肽: Polypeptide
- 铜离子: Copper ion (Cu²⁺)
- 碱性条件: Alkaline condition
- 紫色络合物: Purple complex
- 蛋白质定量分析: Protein quantitation / Protein quantification
- 吸光度: Absorbance
- 硫酸铜: Copper(II) sulfate (CuSO₄)
- 氢氧化钠: Sodium hydroxide (NaOH)
- 酒石酸钾钠: Potassium sodium tartrate (Rochelle salt)
- 双缩脲反应: Biuret reaction
权威参考来源:
- 生物化学标准教材: 如Lehninger Principles of Biochemistry, Biochemistry by Stryer等经典教材均详细描述了双缩脲反应的原理和应用。
- 国家标准方法: 中国国家标准《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》的第一法即为凯氏定氮法,但双缩脲法作为原理相近的比色法,其基础原理在相关蛋白质检测标准文献中常被提及和引用。
- 专业学术数据库: 如PubMed上可检索到大量关于蛋白质检测方法比较和优化的研究论文,其中常涉及双缩脲法。例如,可参考综述文章对不同蛋白质定量方法(包括双缩脲法)的评价。
网络扩展解释
双缩脲试剂是用于检测蛋白质或含多个肽键化合物的分析试剂,其原理基于碱性条件下铜离子与肽键的显色反应。以下是详细解析:
1.定义与组成
双缩脲试剂由两种溶液组成:
- 试剂A:0.1 g/mL的氢氧化钠或氢氧化钾溶液,提供碱性环境。
- 试剂B:0.01 g/mL的硫酸铜溶液,部分配方会加入酒石酸钾钠以稳定铜离子。
2.反应原理
在碱性条件下,铜离子(Cu²⁺)与蛋白质中的肽键(或双缩脲中的类似结构)结合,形成紫红色络合物。
化学式为:
$$
text{多肽或双缩脲} + text{Cu}^{2+} xrightarrow{text{碱性}} text{紫红色络合物}
$$
该反应需至少两个肽键参与,因此二肽(仅含一个肽键)无法显色,而三肽及以上化合物可显色。
3.使用步骤
- 向待测样品中加入试剂A(NaOH),摇匀以创造碱性环境。
- 滴加试剂B(CuSO₄),无需加热,直接观察颜色变化。若呈现紫色,则表明含蛋白质或多肽结构。
4.应用与注意事项
- 应用:主要用于生物实验中蛋白质的定性检测,也用于医学检验和食品分析。
- 与斐林试剂的区别:双缩脲试剂无需水浴,且两种试剂需分开加入。
- 局限性:不能区分蛋白质类型,仅能确认肽键存在。
5.扩展知识
双缩脲试剂名称来源于其最初用途——检测双缩脲(两分子尿素缩合产物)。由于蛋白质的肽键结构与双缩脲相似,该试剂被拓展用于蛋白质检测。
如需更详细实验操作或化学式推导,可参考权威生物化学教材或实验手册。
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