親和層析英文解釋翻譯、親和層析的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 affinity chromatography
分詞翻譯:
親的英語翻譯:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英語翻譯:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【計】 ampersand
【醫】 c.; cum
層的英語翻譯:
layer; region; stage; story; stratum; tier
【計】 layer
【醫】 coat; lamella; lamellae; lamina; laminae; layer; strata; stratum
析的英語翻譯:
analyse; dissect; divide; separate
專業解析
親和層析(Affinity Chromatography)是一種基于生物分子間特異性、可逆結合作用的分離純化技術。它利用固定相(通常為固相載體)上偶聯的特定配體(Ligand)與目标分子(如蛋白質、酶、抗體、核酸等)之間的高親和力及特異性識别能力,如抗原-抗體、酶-底物/抑制劑、受體-配體、核酸-互補鍊等專一性相互作用,從複雜混合物中高效分離、純化目标生物分子。其核心在于生物親和力的選擇性,而非一般的物理化學性質差異。
一、基本原理與過程
- 固定相制備:将具有生物特異性的配體(如抗體、酶底物、金屬離子等)通過化學方法共價結合到層析介質(如瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠)上,形成親和吸附劑。
- 上樣與結合:待分離樣品通過層析柱時,目标分子因與配體特異性結合而被保留在柱上,其他雜質因無結合能力被洗脫流出。
- 洗脫目标物:通過改變緩沖液條件(如pH、離子強度)或加入競争性配體(如遊離抗原、底物類似物),破壞目标分子與配體的結合,實現高純度回收。
二、核心組件術語(漢英對照)
- 配體 (Ligand):與目标分子特異性結合的生物分子(如Protein A用于純化抗體)。
- 載體 (Matrix):固定配體的惰性介質(如Sepharose 4B)。
- 洗脫 (Elution):解離并收集目标分子的步驟,可分特異性(競争性配體)與非特異性(改變緩沖環境)兩類。
- 吸附容量 (Binding Capacity):單位介質可結合目标分子的最大量,反映分離效率。
三、應用領域
- 抗體純化:Protein A/G/L親和層析是單克隆抗體生産的金标準。
- 重組蛋白分離:利用組氨酸标籤(His-tag)與鎳柱(Ni-NTA)的金屬螯合作用純化。
- 核酸純化:寡核苷酸與互補鍊或核酸結合蛋白的特異性結合。
- 酶學研究:純化酶及研究其與抑制劑/輔因子的相互作用。
四、優勢與局限
- 優勢:選擇性極高、純化步驟簡化、活性回收率高。
- 局限:配體成本高、偶聯過程複雜、可能發生配體洩漏影響産物純度。
術語擴展:親和層析又稱親和色譜(Affinity Chromatography),在生物制藥與分子生物學中不可或缺。其英文定義強調"specific reversible biospecific interaction",中文釋義需突出"生物特異性識别"與"可逆結合"的核心特征。
參考文獻來源:
- 《生物化學與分子生物學實驗技術》(高等教育出版社)
- 美國國立生物技術信息中心(NCBI)技術手冊
- 《蛋白質純化指南》(Springer Protocols)
- 中國生物工程學會色譜技術專業委員會技術白皮書
網絡擴展解釋
親和層析是一種基于生物分子間特異性親和力實現分離純化的層析技術。以下從原理、步驟、應用及特點等方面詳細解釋:
一、原理
親和層析的核心是利用生物分子間的特異性識别與可逆結合,如抗原-抗體、酶-底物、激素-受體等配對關系。通過将其中一方(配體)固定于固相載體(如瓊脂糖基質),當含有目标分子的混合物通過層析柱時,僅特異性結合的分子被吸附,其他雜質被洗脫,隨後通過改變緩沖液條件(如pH、離子強度)解離目标分子,實現純化。
二、基本步驟
- 固定配體:将配體(如抗體、酶抑制劑)共價結合到載體上,形成親和吸附劑。
- 吸附目标分子:樣品通過層析柱,目标分子與配體特異性結合,雜質流出。
- 洗脫純化:調整洗脫條件(如添加競争性物質),釋放目标分子并收集。
三、主要應用
- 抗體純化:通過Protein A/G配體特異性結合抗體Fc段,廣泛用于單克隆抗體生産。
- 酶與蛋白分離:利用底物類似物或抑制劑純化特定酶類。
- 核酸與受體研究:如用互補序列分離DNA,或受體蛋白純化。
四、特點與優勢
- 高特異性:僅目标分子被吸附,純化效率高。
- 操作簡便:步驟少,適合不穩定或低濃度樣品。
- 局限性:配體成本高,且需針對不同目标分子定制。
五、擴展分類
根據配體類型可分為:
- 特異性配體層析:如抗原-抗體,選擇性極強但成本高。
- 通用性配體層析:如金屬離子、染料,成本低但需優化洗脫條件。
如需進一步了解具體操作案例或配體選擇,可參考權威文獻或專業實驗手冊。
分類
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