亲和层析英文解释翻译、亲和层析的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 affinity chromatography
分词翻译:
亲的英语翻译:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英语翻译:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【计】 ampersand
【医】 c.; cum
层的英语翻译:
layer; region; stage; story; stratum; tier
【计】 layer
【医】 coat; lamella; lamellae; lamina; laminae; layer; strata; stratum
析的英语翻译:
analyse; dissect; divide; separate
专业解析
亲和层析(Affinity Chromatography)是一种基于生物分子间特异性、可逆结合作用的分离纯化技术。它利用固定相(通常为固相载体)上偶联的特定配体(Ligand)与目标分子(如蛋白质、酶、抗体、核酸等)之间的高亲和力及特异性识别能力,如抗原-抗体、酶-底物/抑制剂、受体-配体、核酸-互补链等专一性相互作用,从复杂混合物中高效分离、纯化目标生物分子。其核心在于生物亲和力的选择性,而非一般的物理化学性质差异。
一、基本原理与过程
- 固定相制备:将具有生物特异性的配体(如抗体、酶底物、金属离子等)通过化学方法共价结合到层析介质(如琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶)上,形成亲和吸附剂。
- 上样与结合:待分离样品通过层析柱时,目标分子因与配体特异性结合而被保留在柱上,其他杂质因无结合能力被洗脱流出。
- 洗脱目标物:通过改变缓冲液条件(如pH、离子强度)或加入竞争性配体(如游离抗原、底物类似物),破坏目标分子与配体的结合,实现高纯度回收。
二、核心组件术语(汉英对照)
- 配体 (Ligand):与目标分子特异性结合的生物分子(如Protein A用于纯化抗体)。
- 载体 (Matrix):固定配体的惰性介质(如Sepharose 4B)。
- 洗脱 (Elution):解离并收集目标分子的步骤,可分特异性(竞争性配体)与非特异性(改变缓冲环境)两类。
- 吸附容量 (Binding Capacity):单位介质可结合目标分子的最大量,反映分离效率。
三、应用领域
- 抗体纯化:Protein A/G/L亲和层析是单克隆抗体生产的金标准。
- 重组蛋白分离:利用组氨酸标签(His-tag)与镍柱(Ni-NTA)的金属螯合作用纯化。
- 核酸纯化:寡核苷酸与互补链或核酸结合蛋白的特异性结合。
- 酶学研究:纯化酶及研究其与抑制剂/辅因子的相互作用。
四、优势与局限
- 优势:选择性极高、纯化步骤简化、活性回收率高。
- 局限:配体成本高、偶联过程复杂、可能发生配体泄漏影响产物纯度。
术语扩展:亲和层析又称亲和色谱(Affinity Chromatography),在生物制药与分子生物学中不可或缺。其英文定义强调"specific reversible biospecific interaction",中文释义需突出"生物特异性识别"与"可逆结合"的核心特征。
参考文献来源:
- 《生物化学与分子生物学实验技术》(高等教育出版社)
- 美国国立生物技术信息中心(NCBI)技术手册
- 《蛋白质纯化指南》(Springer Protocols)
- 中国生物工程学会色谱技术专业委员会技术白皮书
网络扩展解释
亲和层析是一种基于生物分子间特异性亲和力实现分离纯化的层析技术。以下从原理、步骤、应用及特点等方面详细解释:
一、原理
亲和层析的核心是利用生物分子间的特异性识别与可逆结合,如抗原-抗体、酶-底物、激素-受体等配对关系。通过将其中一方(配体)固定于固相载体(如琼脂糖基质),当含有目标分子的混合物通过层析柱时,仅特异性结合的分子被吸附,其他杂质被洗脱,随后通过改变缓冲液条件(如pH、离子强度)解离目标分子,实现纯化。
二、基本步骤
- 固定配体:将配体(如抗体、酶抑制剂)共价结合到载体上,形成亲和吸附剂。
- 吸附目标分子:样品通过层析柱,目标分子与配体特异性结合,杂质流出。
- 洗脱纯化:调整洗脱条件(如添加竞争性物质),释放目标分子并收集。
三、主要应用
- 抗体纯化:通过Protein A/G配体特异性结合抗体Fc段,广泛用于单克隆抗体生产。
- 酶与蛋白分离:利用底物类似物或抑制剂纯化特定酶类。
- 核酸与受体研究:如用互补序列分离DNA,或受体蛋白纯化。
四、特点与优势
- 高特异性:仅目标分子被吸附,纯化效率高。
- 操作简便:步骤少,适合不稳定或低浓度样品。
- 局限性:配体成本高,且需针对不同目标分子定制。
五、扩展分类
根据配体类型可分为:
- 特异性配体层析:如抗原-抗体,选择性极强但成本高。
- 通用性配体层析:如金属离子、染料,成本低但需优化洗脱条件。
如需进一步了解具体操作案例或配体选择,可参考权威文献或专业实验手册。
分类
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