
【化】 nickase(DNA)
cut; kerf; rift
【化】 nick
【醫】 incisio; incision
enzyme
【化】 enzyme; zyme
【醫】 ascus ase; biocatalyst; enzyme; ferment; zymase; zyme; zymin; zymo-
切口酶(Nickase)是一類能夠識别特定DNA序列并在雙鍊DNA的一條鍊上制造單鍊斷裂(即“切口”)的酶。其名稱源于其功能特點——“切口”(nick)指DNA單鍊斷裂。以下是詳細解釋:
指通過切割DNA雙鍊中的一條鍊産生切口,而不造成雙鍊斷裂的核酸酶。
An enzyme that cleaves only one strand of a double-stranded DNA molecule at a specific recognition sequence, creating a single-strand break ("nick").
切口酶通常具有高度特異的識别位點(如CRISPR-Cas9D10A突變體識别NGG PAM序列),僅在目标位點切割一條DNA鍊。
與限制性内切酶(切割雙鍊)不同,切口酶僅水解磷酸二酯鍵中的一條鍊,形成3'-OH和5'-磷酸末端。
用于CRISPR基因編輯系統,通過配對兩個切口酶産生交錯切口(模拟限制酶作用),降低脫靶效應并提高編輯安全性。
在實驗室中誘導可控的DNA損傷,用于研究細胞修複機制(如堿基切除修複通路)。
Cold Spring Harbor Laboratory Press, 第四版. (概述核酸酶分類及功能)
"A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity" (CRISPR-Cas9切口酶改造的奠基研究)
"Double Nicking by RNA-Guided CRISPR Cas9 for Enhanced Genome Editing Specificity" (雙切口酶策略的應用)
注:以上文獻可通過學術數據庫(如PubMed、ScienceDirect)檢索原文。
切口酶(Nicking Enzyme)是分子生物學中一類特殊的限制性内切酶,其作用機制和應用特點如下:
定義與作用機制
切口酶屬于内切酶的一種,能識别雙鍊DNA的特定序列,但僅切割其中一條鍊,形成單鍊切口而非雙鍊斷裂。例如N.Bst9 I可識别位點GAGTC,并在特定位置切割單鍊。
生物學應用
如需更完整的商品化酶種類及技術細節,可參考原始研究資料。
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