
【化】 nickase(DNA)
cut; kerf; rift
【化】 nick
【医】 incisio; incision
enzyme
【化】 enzyme; zyme
【医】 ascus ase; biocatalyst; enzyme; ferment; zymase; zyme; zymin; zymo-
切口酶(Nickase)是一类能够识别特定DNA序列并在双链DNA的一条链上制造单链断裂(即“切口”)的酶。其名称源于其功能特点——“切口”(nick)指DNA单链断裂。以下是详细解释:
指通过切割DNA双链中的一条链产生切口,而不造成双链断裂的核酸酶。
An enzyme that cleaves only one strand of a double-stranded DNA molecule at a specific recognition sequence, creating a single-strand break ("nick").
切口酶通常具有高度特异的识别位点(如CRISPR-Cas9D10A突变体识别NGG PAM序列),仅在目标位点切割一条DNA链。
与限制性内切酶(切割双链)不同,切口酶仅水解磷酸二酯键中的一条链,形成3'-OH和5'-磷酸末端。
用于CRISPR基因编辑系统,通过配对两个切口酶产生交错切口(模拟限制酶作用),降低脱靶效应并提高编辑安全性。
在实验室中诱导可控的DNA损伤,用于研究细胞修复机制(如碱基切除修复通路)。
Cold Spring Harbor Laboratory Press, 第四版. (概述核酸酶分类及功能)
"A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity" (CRISPR-Cas9切口酶改造的奠基研究)
"Double Nicking by RNA-Guided CRISPR Cas9 for Enhanced Genome Editing Specificity" (双切口酶策略的应用)
注:以上文献可通过学术数据库(如PubMed、ScienceDirect)检索原文。
切口酶(Nicking Enzyme)是分子生物学中一类特殊的限制性内切酶,其作用机制和应用特点如下:
定义与作用机制
切口酶属于内切酶的一种,能识别双链DNA的特定序列,但仅切割其中一条链,形成单链切口而非双链断裂。例如N.Bst9 I可识别位点GAGTC,并在特定位置切割单链。
生物学应用
如需更完整的商品化酶种类及技术细节,可参考原始研究资料。
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