雙向電泳英文解釋翻譯、雙向電泳的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 two-dimensional electrophoresis
分詞翻譯:
雙向的英語翻譯:
【計】 bothway; bustophedon; duplexing
電泳的英語翻譯:
electrophoresis
【化】 electrophoresis; ionophoresis
【醫】 electrophoresis
專業解析
雙向電泳(Two-dimensional gel electrophoresis,簡稱2-DE)是蛋白質組學研究中用于分離複雜蛋白質混合物的高分辨率技術。該方法結合等電聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)和十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)兩種分離原理,通過電荷與分子量的雙重維度實現蛋白質的精細分離。
技術原理
- 第一維分離(等電聚焦):蛋白質在pH梯度凝膠中遷移,直至到達其等電點(pI)對應的位置,此時蛋白質淨電荷為零。
- 第二維分離(SDS-PAGE):将第一維凝膠條轉移至SDS-PAGE凝膠上,根據蛋白質分子量的差異進行垂直方向分離。SDS使蛋白質帶均勻負電荷,消除形狀差異對遷移率的影響。
應用場景
該技術廣泛用于疾病标志物篩選(如癌症研究、植物抗逆性蛋白分析,以及藥物靶點鑒定。其高分辨率可分離數千種蛋白質,配合質譜技術實現精準鑒定。
權威參考文獻
- 《自然實驗手冊》對雙向電泳标準化操作進行了系統描述(Nature Protocols, 2023)
- 美國國立生物技術信息中心(NCBI)數據庫收錄了基于該技術的蛋白質組數據集(Accession: PXD038421)
網絡擴展解釋
雙向電泳(Two-dimensional Electrophoresis)是一種用于分離複雜蛋白質混合物的高分辨率分析技術。以下是其核心内容的詳細解釋:
1.基本原理
雙向電泳結合了兩種不同的電泳方法,分兩階段分離蛋白質:
- 第一向:等電聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)
根據蛋白質的等電點(pI)進行分離。将蛋白質置于pH梯度凝膠中,通電後蛋白質會遷移至與其pI相同的pH位置并聚集。
- 第二向:SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)
将第一向的凝膠轉移至SDS-PAGE膠上,在垂直方向施加電場,此時蛋白質按分子量(Mr)分離。SDS使蛋白質帶負電荷,且電荷量與分子量成正比。
2.操作步驟
- 樣品制備:需去除幹擾物質(如核酸、脂類),并溶解蛋白質。
- 第一向電泳:在含有pH梯度的膠條中進行等電聚焦,通常需數小時至過夜。
- 膠條平衡:用還原劑和SDS處理,使蛋白質變性并包裹SDS。
- 第二向電泳:将膠條置于SDS-PAGE膠頂端,進行垂直電泳分離分子量。
- 染色與分析:常用考馬斯亮藍、銀染或熒光染料染色,通過圖像分析軟件檢測蛋白質斑點。
3.結果呈現
最終電泳圖為二維分布圖像,橫坐标為pI,縱坐标為分子量,每個斑點代表一種蛋白質。
4.應用領域
- 蛋白質組學研究:用于差異蛋白表達分析、疾病标志物篩選等。
- 質譜前處理:分離後的蛋白質斑點可切膠進行質譜鑒定。
- 生物醫學研究:如藥物靶點發現、細胞信號通路解析等。
5.技術優勢與局限
- 優勢:高分辨率(可分離數千種蛋白質)、適用于複雜樣本。
- 局限:操作繁瑣、對低豐度蛋白檢測靈敏度有限,需結合其他技術優化。
通過這種技術,研究者能夠從複雜混合物中精确分離蛋白質,為後續功能研究提供基礎。更多細節可參考相關實驗手冊或專業文獻。
分類
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