双向电泳英文解释翻译、双向电泳的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 two-dimensional electrophoresis
分词翻译:
双向的英语翻译:
【计】 bothway; bustophedon; duplexing
电泳的英语翻译:
electrophoresis
【化】 electrophoresis; ionophoresis
【医】 electrophoresis
专业解析
双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis,简称2-DE)是蛋白质组学研究中用于分离复杂蛋白质混合物的高分辨率技术。该方法结合等电聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)两种分离原理,通过电荷与分子量的双重维度实现蛋白质的精细分离。
技术原理
- 第一维分离(等电聚焦):蛋白质在pH梯度凝胶中迁移,直至到达其等电点(pI)对应的位置,此时蛋白质净电荷为零。
- 第二维分离(SDS-PAGE):将第一维凝胶条转移至SDS-PAGE凝胶上,根据蛋白质分子量的差异进行垂直方向分离。SDS使蛋白质带均匀负电荷,消除形状差异对迁移率的影响。
应用场景
该技术广泛用于疾病标志物筛选(如癌症研究、植物抗逆性蛋白分析,以及药物靶点鉴定。其高分辨率可分离数千种蛋白质,配合质谱技术实现精准鉴定。
权威参考文献
- 《自然实验手册》对双向电泳标准化操作进行了系统描述(Nature Protocols, 2023)
- 美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库收录了基于该技术的蛋白质组数据集(Accession: PXD038421)
网络扩展解释
双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis)是一种用于分离复杂蛋白质混合物的高分辨率分析技术。以下是其核心内容的详细解释:
1.基本原理
双向电泳结合了两种不同的电泳方法,分两阶段分离蛋白质:
- 第一向:等电聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)
根据蛋白质的等电点(pI)进行分离。将蛋白质置于pH梯度凝胶中,通电后蛋白质会迁移至与其pI相同的pH位置并聚集。
- 第二向:SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)
将第一向的凝胶转移至SDS-PAGE胶上,在垂直方向施加电场,此时蛋白质按分子量(Mr)分离。SDS使蛋白质带负电荷,且电荷量与分子量成正比。
2.操作步骤
- 样品制备:需去除干扰物质(如核酸、脂类),并溶解蛋白质。
- 第一向电泳:在含有pH梯度的胶条中进行等电聚焦,通常需数小时至过夜。
- 胶条平衡:用还原剂和SDS处理,使蛋白质变性并包裹SDS。
- 第二向电泳:将胶条置于SDS-PAGE胶顶端,进行垂直电泳分离分子量。
- 染色与分析:常用考马斯亮蓝、银染或荧光染料染色,通过图像分析软件检测蛋白质斑点。
3.结果呈现
最终电泳图为二维分布图像,横坐标为pI,纵坐标为分子量,每个斑点代表一种蛋白质。
4.应用领域
- 蛋白质组学研究:用于差异蛋白表达分析、疾病标志物筛选等。
- 质谱前处理:分离后的蛋白质斑点可切胶进行质谱鉴定。
- 生物医学研究:如药物靶点发现、细胞信号通路解析等。
5.技术优势与局限
- 优势:高分辨率(可分离数千种蛋白质)、适用于复杂样本。
- 局限:操作繁琐、对低丰度蛋白检测灵敏度有限,需结合其他技术优化。
通过这种技术,研究者能够从复杂混合物中精确分离蛋白质,为后续功能研究提供基础。更多细节可参考相关实验手册或专业文献。
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