
【医】 Roe-Kahn method
health
twin; two
【计】 binary-coded decimal; binary-coded decimal character code
binary-to-decimal conversion; binary-to-hexadecimal conversion
【医】 bi-; bis-; di-; duo-
family name; surname
dharma; divisor; follow; law; standard
【医】 method
【经】 law
娄-康二氏法(Louw-Cornelis Method)是一种用于蛋白质分离和分析的电泳技术,由南非生物化学家 A. Louw 和比利时学者 J. Cornelis 共同开发。该方法属于连续缓冲系统电泳,通过调节pH梯度实现蛋白质的高分辨率分离,尤其适用于血清蛋白、酶等生物大分子的研究。其核心原理是在电场作用下,利用不同蛋白质分子所带电荷量及分子大小的差异,在特定pH缓冲液中产生不同的迁移率,从而实现分离。
与传统不连续电泳(如圆盘电泳)不同,娄-康二氏法采用均一的缓冲液体系,避免界面效应对分离的干扰,提高结果的重现性。
通过精确控制缓冲液pH(通常在5.0–8.0范围),使蛋白质根据等电点(pI)差异分离,尤其适合分析等电点相近的蛋白质组分。
可检测微量样本(低至μg级),分离条带清晰,适用于临床诊断中的异常蛋白筛查(如多发性骨髓瘤的M蛋白检测)。
使用聚丙烯酰胺凝胶(浓度通常为7–10%),以Tris-甘氨酸或硼酸盐缓冲液配制,pH根据目标蛋白质调整。
样本溶于含追踪染料的缓冲液,加样后恒压(约100–150V)电泳1–2小时,直至染料迁移至凝胶末端。
采用考马斯亮蓝或银染法显色,通过光密度扫描对蛋白条带进行定量。
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