
【化】 radioimmunoelectrophoresis
emanate from; emit; radiate; ray; shed
【化】 emit; radiate; radiation
【醫】 actino-; radiate; radiation; radio-
【化】 immune electrophoresis; immunoelectrophoresis
放射免疫電泳(Radioimmunoelectrophoresis, RIEP)是一種結合了放射性标記技術、免疫學反應和電泳分離原理的高靈敏度分析方法,主要用于檢測和定量分析複雜生物樣本(如血清)中的特定抗原或抗體。其核心原理及過程如下:
放射(Radio-)
指使用放射性同位素(如碘-125, ¹²⁵I)标記抗原或抗體,通過放射性信號放大檢測靈敏度。标記後的分子稱為放射标記探針(Radio-labeled probe)。
免疫(Immuno-)
基于抗原-抗體的特異性結合反應。當标記抗體與目标抗原結合後,形成免疫複合物(Immune complex),具有高特異性。
電泳(Electrophoresis)
在電場作用下,帶電分子(如蛋白質)在凝膠介質中按電荷、大小遷移分離。常用方法包括瓊脂糖凝膠電泳(Agarose Gel Electrophoresis)。
标記與孵育
将放射性同位素标記的抗體(或抗原)與樣本混合,孵育形成抗原-抗體複合物 。
電泳分離
混合液置于凝膠加樣孔,通電後分子按遷移率分離。抗原-抗體複合物因分子量變化呈現特定條帶位置 。
放射自顯影檢測
電泳後凝膠幹燥,與X光膠片貼合。放射性标記物使膠片感光,顯影後出現條帶(沉澱峰),通過條帶位置和強度定性、定量目标分子 。
檢測血清中微量疾病标志物(如腫瘤抗原、自身抗體),用于多發性骨髓瘤、肝炎等診斷 。
分析複雜混合物中特定抗原的理化性質(如等電點、分子量)。
追蹤放射性标記藥物在體内的分布與代謝途徑 。
John Wiley & Sons 出版社,第 2.10 章 "Radioimmunoassay and Related Techniques" [來源:Wiley Online Library]
第 5 版,Elsevier,章節 "Immunochemical Techniques" [來源:ScienceDirect]
Manual for the Laboratory Diagnosis of Viral Infections,放射性标記技術應用指南 [來源:WHO IRIS 數據庫]
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放射免疫電泳 | Radioimmunoelectrophoresis |
放射性标記 | Radio-labeling |
抗原-抗體複合物 | Antigen-Antibody Complex |
瓊脂糖凝膠電泳 | Agarose Gel Electrophoresis |
放射自顯影 | Autoradiography |
放射免疫電泳是一種結合放射性同位素标記技術與免疫電泳的高靈敏度檢測方法,主要用于抗原或抗體的定性與定量分析。其核心原理和特點如下:
技術原理
通過将放射性同位素(如¹²⁵I)标記在抗原或抗體上,利用免疫電泳的沉澱反應形成複合物。肉眼不可見的微量沉澱線通過放射自顯影技術顯現:标記物釋放的射線使感光材料顯影,最終在膠片上形成可見的沉澱弧線。
操作步驟
技術優勢
相較于傳統免疫電泳,靈敏度顯著提高,可檢測極低濃度的目标物質(如甲胎蛋白AFP、免疫球蛋白IgE),適用于疾病早期診斷和微量樣本分析。
應用領域
主要用于臨床醫學的腫瘤标志物檢測、過敏原分析,以及生物研究中的蛋白質相互作用研究。
此方法通過放射性标記與免疫反應的結合,實現了高特異性與靈敏度的平衡,是免疫學檢測中的重要技術之一。
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