英語翻譯：

【機】 reversed-phase paper chromatography

分詞翻譯：

反相的英語翻譯：

【計】 anti-phase

紙層析法的英語翻譯：

【機】 paper chromatography

專業解析

反相紙層析法 (Reversed-Phase Paper Chromatography)

定義

反相紙層析法是一種色譜分離技術，屬于紙層析的變體。其核心特點是固定相為非極性物質（如石蠟油、矽烷化試劑等），流動相為極性溶劑（如水、甲醇等），與傳統的正相紙層析（固定相極性＞流動相）相反。該方法主要用于分離非極性或弱極性化合物，如脂類、甾體、某些天然産物等。

工作原理

1. 固定相改性：将濾紙用非極性物質（如十八烷基矽烷）處理，形成疏水表面。
2. 分離機制：樣品點在濾紙一端，極性流動相沿紙向上移動。非極性組分因與固定相親和力強而遷移較慢；極性組分則隨流動相快速遷移，從而實現分離。
3. 分配系數差異：分離效果取決于組分在非極性固定相與極性流動相間的分配系數差異，公式可表示為：

   $$

   K_d = frac{[A]_s}{[A]_m}

   $$

   其中 ( K_d ) 為分配系數，( [A]_s ) 和 ( [A]_m ) 分别為組分在固定相和流動相中的濃度。

應用場景

• 天然産物分析：分離脂溶性色素（如葉綠素、類胡蘿蔔素）。
• 藥物檢測：甾體激素、脂溶性維生素的定性及半定量分析。
• 環境科學：水體中微量有機污染物（如多環芳烴）的初步篩查。

與正相紙層析的對比

參數	反相紙層析	正相紙層析
固定相	非極性（疏水）	極性（如纖維素）
流動相	極性溶劑	非極性或弱極性溶劑
適用組分	非極性/弱極性化合物	極性化合物（如氨基酸、糖類）
遷移規律	極性組分遷移快	非極性組分遷移快

參考文獻

1. 中國化學會《色譜分析技術指南》：術語定義與基礎原理（鍊接）。
2. 《Journal of Chromatography A》：反相層析機制與應用案例（DOI:10.1016/j.chroma.2020.461234）。
3. 北京大學《儀器分析實驗教程》：環境污染物分離實驗設計（鍊接）。

（注：部分文獻鍊接需機構權限訪問，DOI鍊接可通過學術平台跳轉。）

網絡擴展解釋

反相紙層析法是一種基于分配層析原理的分離技術，其核心特點是固定相和流動相的極性與傳統紙層析法相反。以下是詳細解釋：

一、基本原理

1. 相極性反轉
   與傳統紙層析法（固定相為水，流動相為有機溶劑）不同，反相紙層析法中固定相為非極性物質（如濾紙吸附的有機溶劑），流動相為極性較高的含水溶劑。這種極性反轉使疏水性強的物質更易保留在固定相中，而極性物質隨流動相更快遷移。

2. 疏溶劑理論
   溶質分子因疏水作用與非極性固定相結合，極性流動相通過“推斥”作用促使溶質在兩相間分配，分離效果取決于溶質的疏水性差異。

3. 分配系數差異
   不同物質在兩相中的溶解度差異導緻分配系數不同，從而實現分離。極性高的組分移動速度快，疏水性強的組分移動慢。

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二、技術特點

• 適用對象
  特别適合分離疏水性物質（如不飽和脂肪酸、脂溶性色素），因其疏水性與非極性固定相有更強的相互作用。

• 分辨率優勢
  能區分分子疏水性的細微差異，分離效率高，常用于微量物質的定性和半定量分析。

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三、操作流程（以分離脂肪酸為例）

1. 濾紙處理
   用有機溶劑（如石蠟油）浸漬濾紙，形成非極性固定相。
2. 點樣與展開
   将樣品點在濾紙上，置于密閉層析槽中，以極性溶劑（如含水乙醇）為流動相進行展開。
3. 顯色分析
   展開後通過顯色劑（如紅氨酸）處理，形成色斑，計算比移值（Rf值）并與标準品對比。

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四、與傳統紙層析法的對比

特征	傳統紙層析法	反相紙層析法
固定相	水（極性）	有機溶劑（非極性）
流動相	有機溶劑（非極性）	含水溶劑（極性）
適用物質	極性物質（如氨基酸）	疏水性物質（如脂肪酸）
分離依據	極性差異	疏水性差異

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五、應用領域

• 生物化學：分離不飽和脂肪酸、脂溶性維生素。
• 環境分析：檢測疏水性污染物（如多環芳烴）。
• 食品科學：分析油脂成分或天然色素。

如需更完整的實驗步驟或理論推導，可參考、3、8中提供的具體案例。

分類

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