
【机】 reversed-phase paper chromatography
反相纸层析法 (Reversed-Phase Paper Chromatography)
定义
反相纸层析法是一种色谱分离技术,属于纸层析的变体。其核心特点是固定相为非极性物质(如石蜡油、硅烷化试剂等),流动相为极性溶剂(如水、甲醇等),与传统的正相纸层析(固定相极性>流动相)相反。该方法主要用于分离非极性或弱极性化合物,如脂类、甾体、某些天然产物等。
工作原理
$$
K_d = frac{[A]_s}{[A]_m}
$$
其中 ( K_d ) 为分配系数,( [A]_s ) 和 ( [A]_m ) 分别为组分在固定相和流动相中的浓度。
应用场景
与正相纸层析的对比
参数 | 反相纸层析 | 正相纸层析 |
---|---|---|
固定相 | 非极性(疏水) | 极性(如纤维素) |
流动相 | 极性溶剂 | 非极性或弱极性溶剂 |
适用组分 | 非极性/弱极性化合物 | 极性化合物(如氨基酸、糖类) |
迁移规律 | 极性组分迁移快 | 非极性组分迁移快 |
参考文献
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反相纸层析法是一种基于分配层析原理的分离技术,其核心特点是固定相和流动相的极性与传统纸层析法相反。以下是详细解释:
相极性反转
与传统纸层析法(固定相为水,流动相为有机溶剂)不同,反相纸层析法中固定相为非极性物质(如滤纸吸附的有机溶剂),流动相为极性较高的含水溶剂。这种极性反转使疏水性强的物质更易保留在固定相中,而极性物质随流动相更快迁移。
疏溶剂理论
溶质分子因疏水作用与非极性固定相结合,极性流动相通过“推斥”作用促使溶质在两相间分配,分离效果取决于溶质的疏水性差异。
分配系数差异
不同物质在两相中的溶解度差异导致分配系数不同,从而实现分离。极性高的组分移动速度快,疏水性强的组分移动慢。
适用对象
特别适合分离疏水性物质(如不饱和脂肪酸、脂溶性色素),因其疏水性与非极性固定相有更强的相互作用。
分辨率优势
能区分分子疏水性的细微差异,分离效率高,常用于微量物质的定性和半定量分析。
特征 | 传统纸层析法 | 反相纸层析法 |
---|---|---|
固定相 | 水(极性) | 有机溶剂(非极性) |
流动相 | 有机溶剂(非极性) | 含水溶剂(极性) |
适用物质 | 极性物质(如氨基酸) | 疏水性物质(如脂肪酸) |
分离依据 | 极性差异 | 疏水性差异 |
如需更完整的实验步骤或理论推导,可参考、3、8中提供的具体案例。
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