尺寸排阻色譜法英文解釋翻譯、尺寸排阻色譜法的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 SEC; size exclusion chromatography
分詞翻譯:
尺寸的英語翻譯:
dimension; measure; measurement; size
【化】 dimension
【醫】 dimension
排阻色譜法的英語翻譯:
【化】 exclusion chromatography
專業解析
尺寸排阻色譜法(Size Exclusion Chromatography, SEC),又稱凝膠過濾色譜法(Gel Filtration Chromatography)或凝膠滲透色譜法(Gel Permeation Chromatography, GPC),是一種基于溶質分子尺寸(流體力學體積)差異進行分離的高效液相色譜技術。其核心分離原理是分子篩效應:色譜柱内填充有多孔固定相(凝膠或多孔矽膠),不同尺寸的溶質分子在流經色譜柱時,小分子可進入固定相孔隙内部,流經路徑長、保留時間長;大分子因尺寸大于孔隙直徑而被排阻在孔隙外,隻能沿顆粒間隙流動,路徑短、保留時間短,從而實現按分子尺寸從大到小的順序依次洗脫。
主要應用領域包括:
- 高分子分子量測定:測定合成聚合物(如蛋白質、多糖、核酸)的分子量及其分布,是高分子材料表征的關鍵手段。
- 生物大分子純化:分離蛋白質、酶、抗體等生物樣品中的聚集體或碎片,常用于蛋白質純化流程的最後一步。
- 複合物分析:研究蛋白質-蛋白質、蛋白質-核酸相互作用的組裝狀态。
儀器組成與工作流程:
- 固定相:常用葡聚糖凝膠(Sephadex)、瓊脂糖凝膠(Sepharose)或表面修飾的多孔矽膠,孔徑需匹配目标分子尺寸範圍。
- 流動相:通常為緩沖鹽溶液(如磷酸鹽緩沖液),需維持樣品生物活性并抑制非特異性吸附。
- 檢測器:紫外-可見光譜(UV-Vis)、示差折光檢測器(RI)或光散射檢測器(LS)聯用,尤其多角度光散射(MALS)可直接測定絕對分子量。
技術特點:
- 優點:分離條件溫和,不依賴樣品電荷或極性;保留機制簡單,易于預測洗脫行為;樣品回收率高。
- 局限性:分離度受限于色譜柱分辨率;樣品需溶于流動相且不與固定相發生非尺寸效應相互作用。
關鍵參數定義:
- 排阻極限(Exclusion Limit):固定相可完全排阻的最小分子尺寸,大于該值的分子均在第一峰洗脫。
- 分離範圍(Fractionation Range):固定相能有效分離的分子量區間,取決于孔徑分布。
參考文獻
- International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC). Compendium of Chemical Terminology ("Gold Book"). SEC definition. https://goldbook.iupac.org/terms/view/S05670
- U.S. Food and Drug Administration (FDA). Guidance for Industry: Size Exclusion Chromatography for Biotherapeutic Drug Products. https://www.fda.gov/media/157386/download
- 中國科學院大連化學物理研究所. 《色譜技術叢書:尺寸排阻色譜法》. 科學出版社, 2018. http://www.dicp.ac.cn/kxyj_/cgjs/201811/t20181115_5155355.html
網絡擴展解釋
尺寸排阻色譜法(Size Exclusion Chromatography, SEC),又稱凝膠色譜法或分子排阻色譜法,是一種基于分子尺寸差異實現分離的液相色譜技術。以下從原理、特點和應用三方面進行詳細說明:
一、分離原理
-
分子篩機制
固定相為多孔凝膠(如葡聚糖、瓊脂糖或矽膠),其表面分布不同孔徑的孔穴。大分子因無法進入孔穴而被排阻,直接流出色譜柱;中等分子部分滲透;小分子完全進入孔穴,停留時間最長。
分配系數公式為:
$$
K = frac{[X_n]}{[X_m]}
$$
其中,$K$ 範圍在0到1之間,大分子$K=0$(完全排阻),小分子$K=1$(完全滲透)。
-
洗脫順序
分子按尺寸從大到小依次洗脫,保留時間與分子量呈負相關。
二、技術特點
- 非相互作用分離
固定相與樣品分子間幾乎無化學作用,僅依賴物理尺寸差異,因此柱壽命較長。
- 快速高效
保留時間短(通常數分鐘至半小時),譜峰窄,檢測靈敏度要求較低。
- 分離局限性
僅能分離分子量差異>10%的組分,且需根據目标分子選擇合適孔徑的凝膠。
三、主要應用
- 大分子分析
用于蛋白質、核酸等生物大分子的分子量分布測定及聚合度分析。
- 藥物質量控制
符合藥典标準(如USP通則<129>),檢測單克隆抗體等藥物中的聚集體雜質。
- 工業聚合物表征
分析合成高分子的分子量分布及結構(如凝膠滲透色譜GPC)。
尺寸排阻色譜法通過分子篩效應實現分離,適用于大分子分級和純度分析,在生物醫藥、材料科學等領域具有重要價值。更多細節可參考分析測試百科網等權威來源。
分類
ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ
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