尺寸排阻色谱法英文解释翻译、尺寸排阻色谱法的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 SEC; size exclusion chromatography
分词翻译:
尺寸的英语翻译:
dimension; measure; measurement; size
【化】 dimension
【医】 dimension
排阻色谱法的英语翻译:
【化】 exclusion chromatography
专业解析
尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography, SEC),又称凝胶过滤色谱法(Gel Filtration Chromatography)或凝胶渗透色谱法(Gel Permeation Chromatography, GPC),是一种基于溶质分子尺寸(流体力学体积)差异进行分离的高效液相色谱技术。其核心分离原理是分子筛效应:色谱柱内填充有多孔固定相(凝胶或多孔硅胶),不同尺寸的溶质分子在流经色谱柱时,小分子可进入固定相孔隙内部,流经路径长、保留时间长;大分子因尺寸大于孔隙直径而被排阻在孔隙外,只能沿颗粒间隙流动,路径短、保留时间短,从而实现按分子尺寸从大到小的顺序依次洗脱。
主要应用领域包括:
- 高分子分子量测定:测定合成聚合物(如蛋白质、多糖、核酸)的分子量及其分布,是高分子材料表征的关键手段。
- 生物大分子纯化:分离蛋白质、酶、抗体等生物样品中的聚集体或碎片,常用于蛋白质纯化流程的最后一步。
- 复合物分析:研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸相互作用的组装状态。
仪器组成与工作流程:
- 固定相:常用葡聚糖凝胶(Sephadex)、琼脂糖凝胶(Sepharose)或表面修饰的多孔硅胶,孔径需匹配目标分子尺寸范围。
- 流动相:通常为缓冲盐溶液(如磷酸盐缓冲液),需维持样品生物活性并抑制非特异性吸附。
- 检测器:紫外-可见光谱(UV-Vis)、示差折光检测器(RI)或光散射检测器(LS)联用,尤其多角度光散射(MALS)可直接测定绝对分子量。
技术特点:
- 优点:分离条件温和,不依赖样品电荷或极性;保留机制简单,易于预测洗脱行为;样品回收率高。
- 局限性:分离度受限于色谱柱分辨率;样品需溶于流动相且不与固定相发生非尺寸效应相互作用。
关键参数定义:
- 排阻极限(Exclusion Limit):固定相可完全排阻的最小分子尺寸,大于该值的分子均在第一峰洗脱。
- 分离范围(Fractionation Range):固定相能有效分离的分子量区间,取决于孔径分布。
参考文献
- International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC). Compendium of Chemical Terminology ("Gold Book"). SEC definition. https://goldbook.iupac.org/terms/view/S05670
- U.S. Food and Drug Administration (FDA). Guidance for Industry: Size Exclusion Chromatography for Biotherapeutic Drug Products. https://www.fda.gov/media/157386/download
- 中国科学院大连化学物理研究所. 《色谱技术丛书:尺寸排阻色谱法》. 科学出版社, 2018. http://www.dicp.ac.cn/kxyj_/cgjs/201811/t20181115_5155355.html
网络扩展解释
尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography, SEC),又称凝胶色谱法或分子排阻色谱法,是一种基于分子尺寸差异实现分离的液相色谱技术。以下从原理、特点和应用三方面进行详细说明:
一、分离原理
-
分子筛机制
固定相为多孔凝胶(如葡聚糖、琼脂糖或硅胶),其表面分布不同孔径的孔穴。大分子因无法进入孔穴而被排阻,直接流出色谱柱;中等分子部分渗透;小分子完全进入孔穴,停留时间最长。
分配系数公式为:
$$
K = frac{[X_n]}{[X_m]}
$$
其中,$K$ 范围在0到1之间,大分子$K=0$(完全排阻),小分子$K=1$(完全渗透)。
-
洗脱顺序
分子按尺寸从大到小依次洗脱,保留时间与分子量呈负相关。
二、技术特点
- 非相互作用分离
固定相与样品分子间几乎无化学作用,仅依赖物理尺寸差异,因此柱寿命较长。
- 快速高效
保留时间短(通常数分钟至半小时),谱峰窄,检测灵敏度要求较低。
- 分离局限性
仅能分离分子量差异>10%的组分,且需根据目标分子选择合适孔径的凝胶。
三、主要应用
- 大分子分析
用于蛋白质、核酸等生物大分子的分子量分布测定及聚合度分析。
- 药物质量控制
符合药典标准(如USP通则<129>),检测单克隆抗体等药物中的聚集体杂质。
- 工业聚合物表征
分析合成高分子的分子量分布及结构(如凝胶渗透色谱GPC)。
尺寸排阻色谱法通过分子筛效应实现分离,适用于大分子分级和纯度分析,在生物医药、材料科学等领域具有重要价值。更多细节可参考分析测试百科网等权威来源。
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