凝膠過泸色層分析英文解釋翻譯、凝膠過泸色層分析的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【機】 gel filtraion chromatography
分詞翻譯:
凝膠的英語翻譯:
gel
【化】 gel; jel
【醫】 gel; gelatum; jelly
過的英語翻譯:
across; cross; excessive; over; pass; spend; through
【醫】 per-
色的英語翻譯:
color; expression; hue; kind; quality; scene; woman's looks
【醫】 chrom-; chromato-; chromo-; color
層的英語翻譯:
layer; region; stage; story; stratum; tier
【計】 layer
【醫】 coat; lamella; lamellae; lamina; laminae; layer; strata; stratum
分析的英語翻譯:
analyze; construe; analysis; assay
【計】 parser
【化】 analysis; assaying
【醫】 analysis; anslyze
【經】 analyse
專業解析
凝膠過濾層析(Gel Filtration Chromatography),又稱分子篩層析或尺寸排阻色譜(Size Exclusion Chromatography),是一種基于分子大小差異進行生物大分子分離的液相色譜技術。其核心原理是利用多孔凝膠介質形成的三維網狀結構,使不同分子量的物質在流動相中呈現不同的遷移速率:大分子因無法進入凝膠孔徑而直接通過間隙快速洗脫,小分子則因進入凝膠孔内滞留時間延長,從而實現分離。
該技術的關鍵參數包括:
- 凝膠介質選擇:常用介質如葡聚糖凝膠(Sephadex)、瓊脂糖凝膠(Sepharose)和聚丙烯酰胺凝膠(Bio-Gel P),孔徑大小需根據目标分子量範圍篩選。
- 流動相要求:通常采用緩沖溶液維持生物分子穩定性,流速需與柱床體積匹配以保障分辨率。
- 标定曲線繪制:通過已知分子量的标準品建立洗脫體積-分子量對數線性關系,用于未知樣品分子量測定。
在生物醫藥領域,凝膠過濾層析被廣泛應用于:
- 蛋白質脫鹽及緩沖液置換
- 抗體片段與完整抗體的分離
- 高分子量聚集體的去除
- 複合物解離狀态分析
美國藥典(USP<1043>)明确将其列為生物制品純度檢測的核心方法之一。相較于其他層析技術,其核心優勢在于無需化學修飾樣品,能保持生物分子天然構象,但分辨率受限于分子量差異阈值(通常需>10%差異)。
網絡擴展解釋
凝膠過濾層析(Gel Filtration Chromatography),又稱分子篩層析或尺寸排阻層析,是一種基于分子大小和形狀差異分離生物大分子的技術。以下是詳細解釋:
基本原理
-
分離機制
利用多孔凝膠顆粒(如葡聚糖、瓊脂糖)的孔徑大小差異,小分子可進入孔内,路徑長、洗脫慢;大分子無法進入孔,直接通過顆粒間隙快速流出。因此,大分子先被洗脫,小分子後被洗脫。
-
分子量相關性
洗脫順序與分子量的對數呈線性關系,可通過标準蛋白繪制校準曲線來估算未知樣品的分子量。
主要應用
- 脫鹽與緩沖液置換
去除蛋白質溶液中的鹽離子或小分子雜質(如标籤、遊離核苷酸)。
- 分子量測定
結合标準品,分析目标蛋白或核酸的分子量。
- 複雜樣品分級分離
分離不同大小的蛋白質、多糖或核酸複合物。
常用介質
- Sephadex(葡聚糖凝膠):適合小分子分離(如脫鹽)。
- Sepharose(瓊脂糖凝膠):孔徑較大,用于大蛋白複合物。
- Superdex:高分辨率介質,結合葡聚糖與瓊脂糖優點。
操作步驟
- 裝柱:均勻填充凝膠介質,避免氣泡。
- 平衡:用緩沖液平衡至穩定基線。
- 上樣:樣品體積通常為柱體積的1-2%。
- 洗脫:恒流速洗脫,按分子量分段收集。
- 檢測:通過紫外吸收或電導率監測分離效果。
注意事項
- 樣品預處理:需離心或過濾去除顆粒物,防止堵塞。
- 流速控制:過快會降低分辨率,過慢可能導緻擴散。
- 柱保存:長期不用需添加防腐劑(如0.02% NaN₃),避免幹燥。
優缺點
- 優點:條件溫和(無需結合/洗脫試劑),保持生物活性;適用範圍廣(pH 2-12)。
- 缺點:分辨率低于離子交換層析;上樣量較小。
若需進一步了解具體實驗方案或介質選擇,可參考專業生化實驗手冊或廠商指南(如Cytiva、Bio-Rad)。
分類
ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ
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