凝胶过泸色层分析英文解释翻译、凝胶过泸色层分析的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【机】 gel filtraion chromatography
分词翻译:
凝胶的英语翻译:
gel
【化】 gel; jel
【医】 gel; gelatum; jelly
过的英语翻译:
across; cross; excessive; over; pass; spend; through
【医】 per-
色的英语翻译:
color; expression; hue; kind; quality; scene; woman's looks
【医】 chrom-; chromato-; chromo-; color
层的英语翻译:
layer; region; stage; story; stratum; tier
【计】 layer
【医】 coat; lamella; lamellae; lamina; laminae; layer; strata; stratum
分析的英语翻译:
analyze; construe; analysis; assay
【计】 parser
【化】 analysis; assaying
【医】 analysis; anslyze
【经】 analyse
专业解析
凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography),又称分子筛层析或尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography),是一种基于分子大小差异进行生物大分子分离的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶介质形成的三维网状结构,使不同分子量的物质在流动相中呈现不同的迁移速率:大分子因无法进入凝胶孔径而直接通过间隙快速洗脱,小分子则因进入凝胶孔内滞留时间延长,从而实现分离。
该技术的关键参数包括:
- 凝胶介质选择:常用介质如葡聚糖凝胶(Sephadex)、琼脂糖凝胶(Sepharose)和聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel P),孔径大小需根据目标分子量范围筛选。
- 流动相要求:通常采用缓冲溶液维持生物分子稳定性,流速需与柱床体积匹配以保障分辨率。
- 标定曲线绘制:通过已知分子量的标准品建立洗脱体积-分子量对数线性关系,用于未知样品分子量测定。
在生物医药领域,凝胶过滤层析被广泛应用于:
- 蛋白质脱盐及缓冲液置换
- 抗体片段与完整抗体的分离
- 高分子量聚集体的去除
- 复合物解离状态分析
美国药典(USP<1043>)明确将其列为生物制品纯度检测的核心方法之一。相较于其他层析技术,其核心优势在于无需化学修饰样品,能保持生物分子天然构象,但分辨率受限于分子量差异阈值(通常需>10%差异)。
网络扩展解释
凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography),又称分子筛层析或尺寸排阻层析,是一种基于分子大小和形状差异分离生物大分子的技术。以下是详细解释:
基本原理
-
分离机制
利用多孔凝胶颗粒(如葡聚糖、琼脂糖)的孔径大小差异,小分子可进入孔内,路径长、洗脱慢;大分子无法进入孔,直接通过颗粒间隙快速流出。因此,大分子先被洗脱,小分子后被洗脱。
-
分子量相关性
洗脱顺序与分子量的对数呈线性关系,可通过标准蛋白绘制校准曲线来估算未知样品的分子量。
主要应用
- 脱盐与缓冲液置换
去除蛋白质溶液中的盐离子或小分子杂质(如标签、游离核苷酸)。
- 分子量测定
结合标准品,分析目标蛋白或核酸的分子量。
- 复杂样品分级分离
分离不同大小的蛋白质、多糖或核酸复合物。
常用介质
- Sephadex(葡聚糖凝胶):适合小分子分离(如脱盐)。
- Sepharose(琼脂糖凝胶):孔径较大,用于大蛋白复合物。
- Superdex:高分辨率介质,结合葡聚糖与琼脂糖优点。
操作步骤
- 装柱:均匀填充凝胶介质,避免气泡。
- 平衡:用缓冲液平衡至稳定基线。
- 上样:样品体积通常为柱体积的1-2%。
- 洗脱:恒流速洗脱,按分子量分段收集。
- 检测:通过紫外吸收或电导率监测分离效果。
注意事项
- 样品预处理:需离心或过滤去除颗粒物,防止堵塞。
- 流速控制:过快会降低分辨率,过慢可能导致扩散。
- 柱保存:长期不用需添加防腐剂(如0.02% NaN₃),避免干燥。
优缺点
- 优点:条件温和(无需结合/洗脱试剂),保持生物活性;适用范围广(pH 2-12)。
- 缺点:分辨率低于离子交换层析;上样量较小。
若需进一步了解具体实验方案或介质选择,可参考专业生化实验手册或厂商指南(如Cytiva、Bio-Rad)。
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