
【化】 alkaline splitting
【化】 alkalify
【化】 decomposition; fragmentation; pyrolysis
加堿裂解(Alkaline Lysis)是生物化學與分子生物學實驗中常用的DNA提取技術,指通過添加堿性溶液(如氫氧化鈉)破壞細胞膜和蛋白質結構,促使質粒或基因組DNA釋放的過程。該技術基于堿性條件下細胞膜磷脂雙分子層的皂化反應,以及強堿環境對蛋白質變性的雙重作用,可實現細胞内容物的選擇性分離。
在具體操作中,溶液pH值通常升至12.0-12.5,此時線性染色體DNA會發生不可逆變性,而共價閉合環狀質粒DNA仍保持穩定。通過後續中和步驟(加入乙酸鉀緩沖液),質粒DNA可複性并保留在溶液中,而變性的蛋白質和基因組DNA則形成沉澱。此方法被廣泛應用于《分子克隆實驗指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual)等權威實驗手冊中,其标準化流程已通過美國國立生物技術信息中心(NCBI)數據庫收錄驗證。
加堿裂解是一種基于堿性環境破壞細胞結構并分離生物大分子(如質粒DNA)的常用方法,其核心原理是通過pH變化實現不同DNA分子的選擇性變性與複性差異。以下是具體解析:
主要用于分子生物學中質粒DNA的提取,因其操作簡便、效率高,成為實驗室标準方法。此外,類似原理也用于其他生物大分子的分離純化。
如需實驗具體參數(如溶液配方),可參考、3的原始内容。
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