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加堿裂解英文解釋翻譯、加堿裂解的近義詞、反義詞、例句

英語翻譯:

【化】 alkaline splitting

分詞翻譯:

加堿的英語翻譯:

【化】 alkalify

裂解的英語翻譯:

【化】 decomposition; fragmentation; pyrolysis

專業解析

加堿裂解(Alkaline Lysis)是生物化學與分子生物學實驗中常用的DNA提取技術,指通過添加堿性溶液(如氫氧化鈉)破壞細胞膜和蛋白質結構,促使質粒或基因組DNA釋放的過程。該技術基于堿性條件下細胞膜磷脂雙分子層的皂化反應,以及強堿環境對蛋白質變性的雙重作用,可實現細胞内容物的選擇性分離。

在具體操作中,溶液pH值通常升至12.0-12.5,此時線性染色體DNA會發生不可逆變性,而共價閉合環狀質粒DNA仍保持穩定。通過後續中和步驟(加入乙酸鉀緩沖液),質粒DNA可複性并保留在溶液中,而變性的蛋白質和基因組DNA則形成沉澱。此方法被廣泛應用于《分子克隆實驗指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual)等權威實驗手冊中,其标準化流程已通過美國國立生物技術信息中心(NCBI)數據庫收錄驗證。

網絡擴展解釋

加堿裂解是一種基于堿性環境破壞細胞結構并分離生物大分子(如質粒DNA)的常用方法,其核心原理是通過pH變化實現不同DNA分子的選擇性變性與複性差異。以下是具體解析:

一、基本原理

  1. 細胞裂解:在強堿性(pH≈12.6)條件下,陰離子洗滌劑(如SDS)破壞細胞壁,釋放内容物,同時使染色體DNA和蛋白質變性。
  2. 選擇性複性:中和至中性時,質粒DNA因閉環超螺旋結構迅速複性,而線性染色體DNA因分子量大無法複性,形成不溶網狀物。
  3. 沉澱分離:加入高鹽緩沖液(如KAc)後,變性的蛋白質、染色體DNA等與SDS結合成複合物沉澱,離心後質粒DNA保留于上清液中。

二、關鍵步驟

  1. 堿處理:使用含NaOH和SDS的溶液裂解細胞并變性DNA。
  2. 中和沉澱:酸性乙酸鉀緩沖液中和pH,促使雜質沉澱。
  3. 離心純化:通過離心去除沉澱,保留含質粒DNA的上清液。

三、應用場景

主要用于分子生物學中質粒DNA的提取,因其操作簡便、效率高,成為實驗室标準方法。此外,類似原理也用于其他生物大分子的分離純化。

四、注意事項

如需實驗具體參數(如溶液配方),可參考、3的原始内容。

分類

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