
【化】 alkaline splitting
【化】 alkalify
【化】 decomposition; fragmentation; pyrolysis
加碱裂解(Alkaline Lysis)是生物化学与分子生物学实验中常用的DNA提取技术,指通过添加碱性溶液(如氢氧化钠)破坏细胞膜和蛋白质结构,促使质粒或基因组DNA释放的过程。该技术基于碱性条件下细胞膜磷脂双分子层的皂化反应,以及强碱环境对蛋白质变性的双重作用,可实现细胞内容物的选择性分离。
在具体操作中,溶液pH值通常升至12.0-12.5,此时线性染色体DNA会发生不可逆变性,而共价闭合环状质粒DNA仍保持稳定。通过后续中和步骤(加入乙酸钾缓冲液),质粒DNA可复性并保留在溶液中,而变性的蛋白质和基因组DNA则形成沉淀。此方法被广泛应用于《分子克隆实验指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual)等权威实验手册中,其标准化流程已通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库收录验证。
加碱裂解是一种基于碱性环境破坏细胞结构并分离生物大分子(如质粒DNA)的常用方法,其核心原理是通过pH变化实现不同DNA分子的选择性变性与复性差异。以下是具体解析:
主要用于分子生物学中质粒DNA的提取,因其操作简便、效率高,成为实验室标准方法。此外,类似原理也用于其他生物大分子的分离纯化。
如需实验具体参数(如溶液配方),可参考、3的原始内容。
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