色譜聚焦英文解釋翻譯、色譜聚焦的近義詞、反義詞、例句

英語翻譯：

【化】 chromatofocusing

分詞翻譯：

色譜的英語翻譯：

【計】 colour spectrum
【化】 chromatogram

聚焦的英語翻譯：

focalize; focus; focusing
【計】 focussing
【化】 focusing

專業解析

色譜聚焦（Chromatofocusing）是一種用于分離和純化蛋白質等生物大分子的柱層析技術，其核心原理是利用蛋白質的等電點（pI）差異，在層析柱内形成連續的pH梯度，使不同等電點的蛋白質在遷移過程中分别聚焦（聚焦）在各自等電點對應的pH位置，從而實現高分辨率分離。

以下是其詳細解釋：

技術原理與過程：
- 固定相：使用具有緩沖基團的離子交換層析介質（通常是弱陰離子交換劑）。
- 初始平衡：層析柱首先用具有較高pH值（高于目标蛋白質的pI）的起始緩沖液平衡。在此pH下，帶負電的蛋白質結合到帶正電的陰離子交換劑上。
- 洗脫與pH梯度形成：隨後，使用一種稱為“多緩沖液”（Polybuffer）或“聚焦緩沖液”的低pH洗脫液進行洗脫。這種緩沖液含有多種具有不同pKa值的兩性緩沖物質。
- 聚焦效應：當低pH洗脫液進入柱内，與固定相上的緩沖基團相互作用，在柱内自上而下形成連續、線性的pH梯度（pH從高到低遞減）。隨着洗脫進行，柱内某一點的pH值會緩慢下降。當某處pH值下降到某個蛋白質的等電點（pI）時，該蛋白質在該點的淨電荷變為零，失去與離子交換劑的結合力，從固定相上解離（洗脫）下來。然而，解離下來的蛋白質隨流動相向下遷移時，會立即進入pH值更低（低于其pI）的區域，此時它帶正電荷，會被帶負電的固定相（如果介質有殘留電荷）或更可能的是被帶正電的陰離子交換劑重新吸附。這種解吸-吸附的過程不斷重複，直到該蛋白質遷移到柱内pH值恰好等于其pI的位置。此時，蛋白質淨電荷為零，既不結合也不被吸附，最終以聚焦的、狹窄的區帶被洗脫出柱。不同pI的蛋白質會在柱内不同的pH位置依次聚焦和洗脫。
主要特點與優勢：
- 高分辨率：能夠分離等電點差異非常小（0.05 pH單位或更小）的蛋白質，分辨率優于常規離子交換層析。
- 同時濃縮：聚焦過程本身能将目标蛋白濃縮在一個狹窄的區帶中。
- 預測性強：蛋白質的洗脫順序直接由其等電點決定，pI低的蛋白質先洗脫出來。
- 溫和條件：通常在接近生理條件的緩沖液中進行，有利于保持蛋白質活性。
典型應用：
- 複雜蛋白質混合物的高分辨率分離和分析。
- 蛋白質微異質性（如糖基化、磷酸化導緻的pI微小差異）研究。
- 目标蛋白質的精細純化。
- 蛋白質等電點的測定（通過與已知pI标準品比較洗脫位置）。

漢英術語對照與來源參考：

色譜聚焦 (Sèpǔ Jùjiāo)： Chromatofocusing。該技術名稱直接描述了其核心過程——“聚焦”。來源：專業色譜學文獻與教材通用術語，如《生物化學與分子生物學實驗技術》中色譜技術章節。
等電點 (Děngdiàndiǎn)： Isoelectric Point (pI)。蛋白質在此pH下淨電荷為零。來源：生物化學基礎概念，參考《生物化學》王鏡岩等編著。
離子交換層析 (Lízǐ Jiāohuàn Céngxī)： Ion Exchange Chromatography (IEC)。色譜聚焦基于此技術原理。來源：《蛋白質純化原理與應用》。
多緩沖液 (Duō Huǎnchōng Yè) / 聚焦緩沖液 (Jùjiāo Huǎnchōng Yè)： Polybuffer / Focusing Buffer。用于形成pH梯度的特殊緩沖液。來源：GE Healthcare (現 Cytiva) 等色譜介質供應商技術文檔。
分辨率 (Fēnbiànlǜ)： Resolution。衡量分離效果的關鍵指标。來源：分析化學與色譜學通用術語，美國藥典 (USP) 色譜法通則。

網絡擴展解釋

色譜聚焦（Chromatofocusing）是一種基于生物分子等電點（pI）差異的高分辨率分離技術，主要用于蛋白質等兩性物質的純化。以下從定義、原理、特點等方面詳細解釋：

1.定義

色譜聚焦結合了離子交換層析和等電聚焦的原理，通過自動形成pH梯度，使不同等電點的生物分子在色譜柱中遷移并聚焦于各自pI對應的區域，從而實現分離。其核心是通過電荷差異和pH梯度變化，分離複雜混合物中的蛋白質。

2.原理

pH梯度形成：色譜柱預先用高pH緩沖液平衡，洗脫液為低pH緩沖液。洗脫過程中，緩沖液與固定相相互作用，在柱内自動形成連續的pH梯度（如pH 9→6）。
蛋白質遷移行為：當環境pH高于蛋白質的pI時，蛋白質帶負電，與陰離子交換樹脂結合；隨着洗脫液pH下降，蛋白質逐漸失去電荷并解吸附，直至遷移至pH等于其pI的位置時停止移動。
聚焦效應：遷移過程中，蛋白質因局部pH變化反複吸附-解吸附，最終在pI附近被濃縮成窄峰，分辨率可達0.04–0.05 pH單位。

3.技術特點

高分辨率：聚焦效應使目标物洗脫峰高度濃縮，適合分離性質相近的蛋白質。
無需複雜裝置：pH梯度由緩沖液和固定相自動生成，操作簡便。
大樣本容量：可處理數百毫克級别的蛋白質樣品。

4.應用

主要用于實驗室或工業中純化水溶性蛋白質，尤其適用于等電點差異較小的生物大分子分離。

如需進一步了解操作步驟或具體案例，可參考相關文獻或實驗手冊。