色谱聚焦英文解释翻译、色谱聚焦的近义词、反义词、例句

英语翻译：

【化】 chromatofocusing

分词翻译：

色谱的英语翻译：

【计】 colour spectrum
【化】 chromatogram

聚焦的英语翻译：

focalize; focus; focusing
【计】 focussing
【化】 focusing

专业解析

色谱聚焦（Chromatofocusing）是一种用于分离和纯化蛋白质等生物大分子的柱层析技术，其核心原理是利用蛋白质的等电点（pI）差异，在层析柱内形成连续的pH梯度，使不同等电点的蛋白质在迁移过程中分别聚焦（聚焦）在各自等电点对应的pH位置，从而实现高分辨率分离。

以下是其详细解释：

技术原理与过程：
- 固定相：使用具有缓冲基团的离子交换层析介质（通常是弱阴离子交换剂）。
- 初始平衡：层析柱首先用具有较高pH值（高于目标蛋白质的pI）的起始缓冲液平衡。在此pH下，带负电的蛋白质结合到带正电的阴离子交换剂上。
- 洗脱与pH梯度形成：随后，使用一种称为“多缓冲液”（Polybuffer）或“聚焦缓冲液”的低pH洗脱液进行洗脱。这种缓冲液含有多种具有不同pKa值的两性缓冲物质。
- 聚焦效应：当低pH洗脱液进入柱内，与固定相上的缓冲基团相互作用，在柱内自上而下形成连续、线性的pH梯度（pH从高到低递减）。随着洗脱进行，柱内某一点的pH值会缓慢下降。当某处pH值下降到某个蛋白质的等电点（pI）时，该蛋白质在该点的净电荷变为零，失去与离子交换剂的结合力，从固定相上解离（洗脱）下来。然而，解离下来的蛋白质随流动相向下迁移时，会立即进入pH值更低（低于其pI）的区域，此时它带正电荷，会被带负电的固定相（如果介质有残留电荷）或更可能的是被带正电的阴离子交换剂重新吸附。这种解吸-吸附的过程不断重复，直到该蛋白质迁移到柱内pH值恰好等于其pI的位置。此时，蛋白质净电荷为零，既不结合也不被吸附，最终以聚焦的、狭窄的区带被洗脱出柱。不同pI的蛋白质会在柱内不同的pH位置依次聚焦和洗脱。
主要特点与优势：
- 高分辨率：能够分离等电点差异非常小（0.05 pH单位或更小）的蛋白质，分辨率优于常规离子交换层析。
- 同时浓缩：聚焦过程本身能将目标蛋白浓缩在一个狭窄的区带中。
- 预测性强：蛋白质的洗脱顺序直接由其等电点决定，pI低的蛋白质先洗脱出来。
- 温和条件：通常在接近生理条件的缓冲液中进行，有利于保持蛋白质活性。
典型应用：
- 复杂蛋白质混合物的高分辨率分离和分析。
- 蛋白质微异质性（如糖基化、磷酸化导致的pI微小差异）研究。
- 目标蛋白质的精细纯化。
- 蛋白质等电点的测定（通过与已知pI标准品比较洗脱位置）。

汉英术语对照与来源参考：

色谱聚焦 (Sèpǔ Jùjiāo)： Chromatofocusing。该技术名称直接描述了其核心过程——“聚焦”。来源：专业色谱学文献与教材通用术语，如《生物化学与分子生物学实验技术》中色谱技术章节。
等电点 (Děngdiàndiǎn)： Isoelectric Point (pI)。蛋白质在此pH下净电荷为零。来源：生物化学基础概念，参考《生物化学》王镜岩等编著。
离子交换层析 (Lízǐ Jiāohuàn Céngxī)： Ion Exchange Chromatography (IEC)。色谱聚焦基于此技术原理。来源：《蛋白质纯化原理与应用》。
多缓冲液 (Duō Huǎnchōng Yè) / 聚焦缓冲液 (Jùjiāo Huǎnchōng Yè)： Polybuffer / Focusing Buffer。用于形成pH梯度的特殊缓冲液。来源：GE Healthcare (现 Cytiva) 等色谱介质供应商技术文档。
分辨率 (Fēnbiànlǜ)： Resolution。衡量分离效果的关键指标。来源：分析化学与色谱学通用术语，美国药典 (USP) 色谱法通则。

网络扩展解释

色谱聚焦（Chromatofocusing）是一种基于生物分子等电点（pI）差异的高分辨率分离技术，主要用于蛋白质等两性物质的纯化。以下从定义、原理、特点等方面详细解释：

1.定义

色谱聚焦结合了离子交换层析和等电聚焦的原理，通过自动形成pH梯度，使不同等电点的生物分子在色谱柱中迁移并聚焦于各自pI对应的区域，从而实现分离。其核心是通过电荷差异和pH梯度变化，分离复杂混合物中的蛋白质。

2.原理

pH梯度形成：色谱柱预先用高pH缓冲液平衡，洗脱液为低pH缓冲液。洗脱过程中，缓冲液与固定相相互作用，在柱内自动形成连续的pH梯度（如pH 9→6）。
蛋白质迁移行为：当环境pH高于蛋白质的pI时，蛋白质带负电，与阴离子交换树脂结合；随着洗脱液pH下降，蛋白质逐渐失去电荷并解吸附，直至迁移至pH等于其pI的位置时停止移动。
聚焦效应：迁移过程中，蛋白质因局部pH变化反复吸附-解吸附，最终在pI附近被浓缩成窄峰，分辨率可达0.04–0.05 pH单位。

3.技术特点

高分辨率：聚焦效应使目标物洗脱峰高度浓缩，适合分离性质相近的蛋白质。
无需复杂装置：pH梯度由缓冲液和固定相自动生成，操作简便。
大样本容量：可处理数百毫克级别的蛋白质样品。

4.应用

主要用于实验室或工业中纯化水溶性蛋白质，尤其适用于等电点差异较小的生物大分子分离。

如需进一步了解操作步骤或具体案例，可参考相关文献或实验手册。