瓊脂電泳英文解釋翻譯、瓊脂電泳的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 agar electrophoresis
【醫】 agar electrophoresis
分詞翻譯:
脂的英語翻譯:
fat; grease; rouge
【化】 butter
【醫】 adeps; adipo-; fat; lipid; lipide; lipin; lipoid; pio-; stearo-
steato-
電泳的英語翻譯:
electrophoresis
【化】 electrophoresis; ionophoresis
【醫】 electrophoresis
專業解析
瓊脂電泳(Agarose Gel Electrophoresis)是一種廣泛應用于分子生物學領域的分析技術,主要用于分離、鑒定和純化DNA或RNA片段。其名稱可拆解為以下兩部分:
-
瓊脂(Agarose)
指從海藻中提取的天然線性多糖聚合物(瓊脂糖),中文“瓊”常形容美玉,此處引申指其形成的透明凝膠基質。在實驗中,瓊脂糖粉末加熱溶解後冷卻凝固,形成具有分子篩網孔結構的三維凝膠。
-
電泳(Electrophoresis)
“電”指電場驅動,“泳”指帶電粒子的遷移運動。該技術利用DNA/RNA分子在緩沖液中帶負電的特性,在電場作用下向陽極移動,不同大小的片段因凝膠孔徑阻力差異實現分離。
技術原理與流程
- 分離機制:DNA片段在瓊脂糖凝膠中遷移速率與分子量成反比。小片段阻力小、遷移快;大片段阻力大、遷移慢,最終形成按大小排列的條帶(圖1示意)。
- 關鍵參數:
- 凝膠濃度(0.5%-2%):濃度越高,孔徑越小,適合分離小片段(如2%凝膠分離100-500 bp DNA)。
- 電壓(1-10 V/cm):電壓過高會導緻條帶擴散或凝膠熔化。
- 緩沖液:常用TAE(Tris-乙酸-EDTA)或TBE(Tris-硼酸-EDTA)維持pH與離子強度。
- 結果可視化:加入核酸染料(如溴化乙錠、SYBR Safe)染色後,紫外燈下觀察熒光條帶,通過與DNA分子量标準品(Marker)比對确定片段大小。
核心應用場景
- PCR産物驗證:确認擴增片段大小及特異性,例如檢測目标基因是否成功擴增(圖2示例)。
- DNA酶切分析:評估限制性内切酶消化效果,通過片段分布判斷酶切是否完全。
- 核酸定量與純化:粗略估算DNA濃度(條帶亮度),或切膠回收目的片段用于後續實驗。
- RNA完整性檢測:變性瓊脂糖凝膠電泳可觀察rRNA條帶(28S/18S),評估RNA降解程度。
權威參考文獻
- Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press. 鍊接
- "Agarose Gel Electrophoresis for DNA". Nature Education, Scitable. 鍊接
- Lee, P. Y., et al. (2012). "Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments". Journal of Visualized Experiments, (62), e3923. 鍊接
- Rio, D. C., et al. (2010). "RNA Extraction and Analysis". Cold Spring Harbor Protocols. 鍊接
網絡擴展解釋
瓊脂電泳是一種以瓊脂或瓊脂糖為支持介質的電泳技術,主要用于分離生物大分子(如蛋白質、核酸等)。以下是其核心要點:
1.定義與介質特性
瓊脂電泳利用瓊脂或瓊脂糖凝膠的網狀結構作為分離基質。瓊脂糖是瓊脂中提取的中性多糖,形成的凝膠孔徑較大,適合分離大分子物質(如DNA、RNA、病毒等)。傳統瓊脂可能含帶電雜質,而瓊脂糖純度更高,可減少電滲作用幹擾。
2.分離原理
- 電荷效應:帶電分子在電場中向相反電極遷移,遷移速率與電荷量成正比。
- 分子篩效應:凝膠孔徑阻礙大分子移動,小分子遷移更快。例如,DNA帶負電荷,向正極移動時,較小片段更快穿過瓊脂糖網絡。
3.主要應用
- 核酸分析:按片段大小分離DNA/RNA,通過紫外成像觀察條帶(如PCR産物驗證)。
- 蛋白質研究:傳統瓊脂電泳可用于免疫分析,如檢測抗原純度或抗體特異性。
- 病毒與大分子分離:因支持大孔徑,適合病毒顆粒等超大分子分離。
4.操作步驟
① 制備瓊脂糖凝膠(加熱溶解後冷卻凝固);
② 加樣并施加電場;
③ 染色(如核酸用EB或SYBR染料);
④ 紫外燈下觀察條帶位置。
5.優缺點
- 優點:操作簡便、成本低、分辨率較高(尤其核酸)。
- 局限:對蛋白質的分辨率低于聚丙烯酰胺凝膠;RNA易形成二級結構影響遷移。
如需更詳細步驟或演示視頻,可參考的完整内容。
分類
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