
【化】 ninhydrin reaction
hydration
【化】 hydration
【醫】 hydration
【醫】 ninhydrin reaction; triketohydrindene reaction
水合茚三酮反應(Ninhydrin Reaction)是生物化學和法醫學中用于檢測氨基酸或蛋白質的重要顯色反應。該反應中,茚三酮(C₉H₆O₄)與氨基酸的α-氨基在弱酸性條件下加熱,生成藍紫色化合物魯赫曼紫(Ruhemann's purple),其化學反應式為:
$$
text{氨基酸} + text{茚三酮} xrightarrow{Delta, text{pH}=5} text{魯赫曼紫} + text{CO}_2 + text{H}_2text{O}
$$
特異性檢測
該反應對α-氨基酸具有高度選擇性,伯胺類物質(如賴氨酸、脯氨酸)會産生特定顔色差異。例如,脯氨酸生成黃色産物,而多數氨基酸顯紫色。
跨學科應用
反應條件優化
最佳反應溫度為80-100℃,pH值需控制在4-6之間,顯色靈敏度可達微克級(美國國家生物技術信息中心文獻)。
水合茚三酮反應是檢測α-氨基酸、多肽及蛋白質的經典顯色反應,其核心機制為氨基酸的α-氨基與茚三酮在特定條件下的氧化縮合反應。以下是詳細解釋:
氧化分解階段
氨基酸在弱酸性(pH 5-7)環境中與水合茚三酮共熱,α-氨基被氧化,釋放氨(NH₃)、二氧化碳(CO₂)和醛類化合物,同時水合茚三酮被還原為還原型茚三酮。
縮合顯色階段
還原型茚三酮與另一分子水合茚三酮及氨進一步縮合,形成共轭結構擴大的藍紫色化合物(最大吸收波長570nm)。此顔色變化源于共轭體系對可見光的吸收特性。
該反應通過顔色變化直觀反映氨基酸的存在,兼具高靈敏度和特異性,是生物化學領域的重要檢測手段。
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