亲和色谱法英文解释翻译、亲和色谱法的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 affinity chromatography
分词翻译:
亲的英语翻译:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英语翻译:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【计】 ampersand
【医】 c.; cum
色谱法的英语翻译:
【化】 chromatography
【医】 chromatography
专业解析
亲和色谱法(Affinity Chromatography),是一种基于生物分子间特异性、可逆结合作用的高选择性分离纯化技术。其核心原理是利用固定相(常为色谱填料)上共价结合的特定配体(Ligand),与流动相中待分离的目标物质(如蛋白质、酶、抗体、核酸等)发生高度特异的生物识别与结合,从而将目标物从复杂混合物中捕获分离,再通过改变洗脱条件(如pH、离子强度、竞争剂)使目标物解吸附,实现纯化。
关键原理与过程
-
特异性识别基础
依赖于生物分子间的天然相互作用,如:
- 抗原-抗体结合:抗体作为配体纯化抗原,或抗原作为配体纯化抗体。
- 酶-底物/抑制剂/辅因子结合:利用酶的底物类似物或抑制剂作为配体纯化酶。
- 受体-配体结合:如激素受体与激素的相互作用。
- 核酸互补杂交:寡核苷酸配体纯化互补核酸序列。
- 凝集素-糖类结合:如Con A 凝集素纯化糖蛋白。
- 金属螯合:固定化金属离子(如Ni²⁺)纯化带组氨酸标签(His-tag)的重组蛋白。
-
色谱过程
- 装柱与平衡:将连接有特异性配体的固相载体(如琼脂糖凝胶)装入色谱柱,并用适宜的缓冲液平衡。
- 上样与结合:样品混合物通过色谱柱。目标分子因与固定配体特异性结合而被捕获在柱上。
- 洗涤:用缓冲液洗去未结合或非特异性结合的杂质。
- 洗脱:通过改变洗脱条件(如:改变pH、离子强度;加入竞争性配体;加入变性剂;使用亲和洗脱剂)破坏目标物与配体间的特异性结合,将目标物释放并收集。
- 再生:将色谱柱恢复至初始状态,以便重复使用。
核心优势
- 高选择性/高纯度:基于生物特异性,一步纯化即可获得高纯度产物。
- 高回收率:温结合与洗脱条件有利于保持目标生物分子的活性。
- 浓缩作用:可从稀溶液中富集目标物。
主要应用领域
- 生物制药:单克隆抗体、重组蛋白、疫苗、血液制品的纯化。
- 酶学研究:酶的分离纯化、抑制剂筛选。
- 基因工程:带标签(如His-tag, GST-tag)重组蛋白的纯化。
- 诊断试剂:特定抗体或抗原的制备。
- 糖生物学:糖蛋白、糖链的分离分析。
- 核酸研究:特定DNA/RNA序列的分离纯化。
参考文献来源
- 《生物化学与分子生物学实验技术》(高等教育出版社):系统阐述亲和色谱原理、载体、配体选择及操作流程。
- 《蛋白质纯化指南》(科学出版社):详细介绍各类亲和色谱策略在蛋白质纯化中的应用实例与优化方案。
- 《色谱》期刊相关综述论文:提供亲和色谱技术的最新进展、新型配体开发及应用案例(可通过知网、Web of Science等平台检索)。
- 《Current Protocols in Protein Science》:提供标准化的亲和色谱实验操作方案(参见相关章节)。
(注:由于无法提供实时有效链接,以上来源为推荐查阅的权威书籍与期刊,可通过图书馆或学术数据库获取详细信息。)
网络扩展解释
亲和色谱法是一种基于生物分子间特异性亲和力的分离纯化技术,广泛应用于生物活性物质的提取和分析。以下是其核心要点:
一、基本原理
亲和色谱法利用生物大分子(如酶、抗原、抗体等)与对应配基(如底物、抗体、受体等)之间的特异性可逆结合实现分离。例如,抗原-抗体、激素-受体等配对可通过高亲和力结合,而其他杂质因无特异性结合被洗脱。
二、操作步骤
- 配基固相化:将一方配基(如抗体)固定在不溶性载体(如琼脂糖凝胶)上,形成固定相。
- 亲和吸附:待分离混合物通过色谱柱时,目标分子与固定相特异性结合,杂质被洗去。
- 解吸附:通过改变pH、离子强度或加入竞争性分子等条件,使目标分子与配基分离并洗脱。
三、主要应用
- 蛋白质纯化:尤其适用于酶、抗体、抗原的分离(如单克隆抗体纯化);
- 核酸研究:分离互补DNA/RNA片段;
- 病毒与细胞分离:利用表面受体特异性结合。
四、技术特点
优势 |
局限性 |
高选择性(可区分结构相似分子) |
需针对不同目标制备专用色谱柱 |
温和条件(保持生物活性) |
配基成本较高 |
高效快速(单次分离纯度可达95%以上) |
仅适用于有已知配基的分子 |
五、典型载体
最常用琼脂糖凝胶(如Sepharose),因其羟基丰富易于配基偶联,且理化性质稳定。
通过这种特异性识别机制,亲和色谱法在生物制药和生命科学研究中具有不可替代性,但其应用范围受限于已知分子相互作用对的可用性。
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