親和色譜法英文解釋翻譯、親和色譜法的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 affinity chromatography
分詞翻譯:
親的英語翻譯:
benignity; for oneself; parent; relative
和的英語翻譯:
and; draw; gentle; kind; mild; harmonious; mix with; sum; summation
together with
【計】 ampersand
【醫】 c.; cum
色譜法的英語翻譯:
【化】 chromatography
【醫】 chromatography
專業解析
親和色譜法(Affinity Chromatography),是一種基于生物分子間特異性、可逆結合作用的高選擇性分離純化技術。其核心原理是利用固定相(常為色譜填料)上共價結合的特定配體(Ligand),與流動相中待分離的目标物質(如蛋白質、酶、抗體、核酸等)發生高度特異的生物識别與結合,從而将目标物從複雜混合物中捕獲分離,再通過改變洗脫條件(如pH、離子強度、競争劑)使目标物解吸附,實現純化。
關鍵原理與過程
-
特異性識别基礎
依賴于生物分子間的天然相互作用,如:
- 抗原-抗體結合:抗體作為配體純化抗原,或抗原作為配體純化抗體。
- 酶-底物/抑制劑/輔因子結合:利用酶的底物類似物或抑制劑作為配體純化酶。
- 受體-配體結合:如激素受體與激素的相互作用。
- 核酸互補雜交:寡核苷酸配體純化互補核酸序列。
- 凝集素-糖類結合:如Con A 凝集素純化糖蛋白。
- 金屬螯合:固定化金屬離子(如Ni²⁺)純化帶組氨酸标籤(His-tag)的重組蛋白。
-
色譜過程
- 裝柱與平衡:将連接有特異性配體的固相載體(如瓊脂糖凝膠)裝入色譜柱,并用適宜的緩沖液平衡。
- 上樣與結合:樣品混合物通過色譜柱。目标分子因與固定配體特異性結合而被捕獲在柱上。
- 洗滌:用緩沖液洗去未結合或非特異性結合的雜質。
- 洗脫:通過改變洗脫條件(如:改變pH、離子強度;加入競争性配體;加入變性劑;使用親和洗脫劑)破壞目标物與配體間的特異性結合,将目标物釋放并收集。
- 再生:将色譜柱恢複至初始狀态,以便重複使用。
核心優勢
- 高選擇性/高純度:基于生物特異性,一步純化即可獲得高純度産物。
- 高回收率:溫結合與洗脫條件有利于保持目标生物分子的活性。
- 濃縮作用:可從稀溶液中富集目标物。
主要應用領域
- 生物制藥:單克隆抗體、重組蛋白、疫苗、血液制品的純化。
- 酶學研究:酶的分離純化、抑制劑篩選。
- 基因工程:帶标籤(如His-tag, GST-tag)重組蛋白的純化。
- 診斷試劑:特定抗體或抗原的制備。
- 糖生物學:糖蛋白、糖鍊的分離分析。
- 核酸研究:特定DNA/RNA序列的分離純化。
參考文獻來源
- 《生物化學與分子生物學實驗技術》(高等教育出版社):系統闡述親和色譜原理、載體、配體選擇及操作流程。
- 《蛋白質純化指南》(科學出版社):詳細介紹各類親和色譜策略在蛋白質純化中的應用實例與優化方案。
- 《色譜》期刊相關綜述論文:提供親和色譜技術的最新進展、新型配體開發及應用案例(可通過知網、Web of Science等平台檢索)。
- 《Current Protocols in Protein Science》:提供标準化的親和色譜實驗操作方案(參見相關章節)。
(注:由于無法提供實時有效鍊接,以上來源為推薦查閱的權威書籍與期刊,可通過圖書館或學術數據庫獲取詳細信息。)
網絡擴展解釋
親和色譜法是一種基于生物分子間特異性親和力的分離純化技術,廣泛應用于生物活性物質的提取和分析。以下是其核心要點:
一、基本原理
親和色譜法利用生物大分子(如酶、抗原、抗體等)與對應配基(如底物、抗體、受體等)之間的特異性可逆結合實現分離。例如,抗原-抗體、激素-受體等配對可通過高親和力結合,而其他雜質因無特異性結合被洗脫。
二、操作步驟
- 配基固相化:将一方配基(如抗體)固定在不溶性載體(如瓊脂糖凝膠)上,形成固定相。
- 親和吸附:待分離混合物通過色譜柱時,目标分子與固定相特異性結合,雜質被洗去。
- 解吸附:通過改變pH、離子強度或加入競争性分子等條件,使目标分子與配基分離并洗脫。
三、主要應用
- 蛋白質純化:尤其適用于酶、抗體、抗原的分離(如單克隆抗體純化);
- 核酸研究:分離互補DNA/RNA片段;
- 病毒與細胞分離:利用表面受體特異性結合。
四、技術特點
優勢 |
局限性 |
高選擇性(可區分結構相似分子) |
需針對不同目标制備專用色譜柱 |
溫和條件(保持生物活性) |
配基成本較高 |
高效快速(單次分離純度可達95%以上) |
僅適用于有已知配基的分子 |
五、典型載體
最常用瓊脂糖凝膠(如Sepharose),因其羟基豐富易于配基偶聯,且理化性質穩定。
通過這種特異性識别機制,親和色譜法在生物制藥和生命科學研究中具有不可替代性,但其應用範圍受限于已知分子相互作用對的可用性。
分類
ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ
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