restriction enzyme是什麼意思,restriction enzyme的意思翻譯、用法、同義詞、例句
常用詞典
[遺] 限制性内切酶;[遺] 限制酶
例句
This is the website of the Restriction Enzyme Database.
這是限制酶數據庫的網站。
Restriction enzyme site analysis was used to confirm the mutation.
突變位點經限制性内切酶分析證實。
Note: Underline sequences are cleavage sites of restriction enzyme.
注:标有下劃線的堿基序列為限制酶切位點。
The recombinants were analyzed and identified by restriction enzyme, PCR and sequencing.
通過酶切、PCR及測序鑒定各重組體。
Both genes were correctly cloned and identified by PCR, restriction enzyme digestion and sequencing.
經pcr鑒定、酶切鑒定和測序說明所克隆的兩種基因是正确的。
同義詞
|restriction endonuclease;限制性内切酶;[遺]限制酶
專業解析
限制性内切酶(Restriction Enzyme),又稱限制酶,是一類由細菌産生的、能夠識别雙鍊DNA分子中特定核苷酸序列(稱為限制性位點或識别序列)并在特定位點切割DNA磷酸二酯鍵的酶。它們是分子生物學、基因工程和生物技術中不可或缺的關鍵工具。
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核心功能與機制:
- 識别特異性:每種限制性内切酶都有其高度特異的識别序列,通常長度為4到8個堿基對。最常見的識别序列是回文序列(palindromic sequence),即DNA雙鍊上的序列正讀和反讀都相同。例如,常用的EcoRI識别序列是5'-GAATTC-3'(互補鍊為3'-CTTAAG-5')。
- 切割DNA:在識别到其特定的序列後,限制性内切酶會催化水解反應,切斷DNA雙鍊中的磷酸二酯鍵。根據切割方式的不同,主要分為:
- 産生粘性末端:在識别序列的兩條鍊上交錯切割,産生具有單鍊突出末端的DNA片段(如EcoRI切割産生5'-AATT-3'突出)。
- 産生平末端:在識别序列的兩條鍊上對稱切割,産生平齊末端的DNA片段(如SmaI切割産生平末端)。
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生物學意義(在細菌中的作用):
- 限制性内切酶是細菌限制-修飾系統(Restriction-Modification system)的一部分。該系統是細菌的一種防禦機制,用于保護自身DNA免受外來DNA(如噬菌體DNA)的入侵。
- 與限制酶配對的通常是甲基化酶(Modification enzyme)。甲基化酶能夠識别相同的DNA序列,并将該序列中的特定堿基(通常是腺嘌呤或胞嘧啶)甲基化。甲基化後的DNA序列不會被細菌自身的限制酶切割。
- 因此,當外源(未甲基化的)DNA進入細菌時,會被限制酶識别并切割降解,而細菌自身的DNA(已被甲基化酶修飾)則受到保護。
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在基因工程中的應用:
- DNA克隆的核心工具:限制性内切酶是重組DNA技術的基礎。科學家利用它們将目的基因(被切割成片段)和載體(如質粒、病毒DNA)在特定位點切開,然後通過DNA連接酶将兩者連接起來,構建重組DNA分子。
- DNA圖譜分析:通過使用不同的限制酶切割DNA,然後進行凝膠電泳分離,可以繪制出DNA的限制性酶切圖譜(Restriction map),用于分析DNA的結構、大小、突變(如限制性片段長度多态性,RFLP)等。
- 基因操作:用于基因敲除、基因插入、構建表達載體等多種遺傳操作。
- DNA指紋鑒定與診斷:基于限制酶切割産生的片段長度多态性,可用于法醫學鑒定、親子鑒定以及某些遺傳性疾病的診斷。
引用參考:
- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2002). Molecular Biology of the Cell (4th ed.). Garland Science. (權威細胞生物學教科書,詳細闡述限制-修飾系統及酶的功能)。
- Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press. (分子克隆經典手冊,深入介紹限制酶的類型、選擇及在克隆中的應用)。
- National Center for Biotechnology Information (NCBI). Restriction Enzymes. (提供限制酶數據庫及信息,如識别序列、切割方式等)。
- New England Biolabs (NEB). Restriction Enzymes Overview. (領先的酶生産商官網,提供詳盡的限制酶産品信息、應用指南和技術資源)。
網絡擴展資料
restriction enzyme(限制性内切酶)是生物學中一類重要的酶,主要用于切割DNA分子。以下是其詳細解釋:
1. 基本定義
限制性内切酶是細菌産生的一類酶,能夠識别DNA分子上的特定序列(稱為限制性位點),并在這些位點切割雙鍊DNA。其英文名稱中:
- restriction(限制)指細菌利用這類酶限制病毒DNA入侵;
- enzyme(酶)表明其生物催化功能。
2. 名稱來源與分類
英文全稱為 restriction endonuclease,其中:
- endo-(内)表示酶從DNA鍊内部切割,區别于僅切割末端的“外切酶”(exonuclease)。
根據作用機制,主要分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,其中Ⅱ型因識别位點明确且切割精準,被廣泛應用于基因工程。
3. 功能與應用
- 切割DNA後産生黏性末端或平末端,便于重組DNA技術中連接不同來源的基因片段;
- 是分子克隆、基因測序等技術的核心工具,被譽為“基因剪刀”。
4. 生物學意義
細菌通過限制性内切酶降解外來病毒DNA,形成天然防禦系統。其發現為1978年諾貝爾生理學或醫學獎的重要成果之一。
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