
【化】 differential centrifugation
差速离心(Differential Centrifugation)是一种基于物质物理特性差异进行分离的实验室技术,广泛应用于生物学、生物化学领域。其英文术语"differential centrifugation"直接反映了通过差异沉降实现分离的核心原理。
该技术主要通过控制离心机转速与离心时间,利用细胞组分间的密度梯度差异实现分层分离。较大密度的颗粒(如细胞核)在较低速离心时率先沉淀,而较小密度的组分(如微粒体)需要更高转速才能沉降。标准操作流程包含四个关键阶段:
在生物医学研究中,该技术被证实能有效分离线粒体、溶酶体等细胞器,为蛋白质组学研究提供基础样本。根据《分子生物学技术手册》记载,成功实施差速离心需精确控制离心介质渗透压,并建议结合蔗糖密度梯度离心进行二次纯化。
参考文献
差速离心是一种基于颗粒大小和密度差异的分离技术,通过逐步增加离心力实现不同组分的分级沉降。以下是其详细解析:
定义与基本原理
差速离心利用颗粒的沉降系数差异,通过多次离心步骤分离混合物。较大或密度较高的颗粒在较低离心力下优先沉降,剩余上清液再以更高转速处理较小颗粒。公式推导中,离心力$F=Mω²r$与颗粒质量(M)、角速度(ω)和旋转半径(r)相关,沉降速度$dr/dt$与颗粒体积(V)、密度差(D-D')成正比,与摩擦系数(f)成反比。
操作步骤
应用与限制
与密度梯度离心的区别
|对比项 | 差速离心 | 密度梯度离心 |
|------------------|----------------------------|----------------------------|
|原理 | 依赖颗粒沉降速度差异 | 依赖颗粒密度差异 |
|离心次数 | 多次不同转速离心 | 单次离心(梯度介质中沉降)|
|分离精度 | 适用于差异大的组分 | 可分离密度相近的颗粒 |
该方法在细胞生物学和生物化学中广泛应用,但需结合后续纯化步骤以提高组分纯度。
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