
【化】 ultramicrospectrophotometry
exceed; go beyond; overtake
【计】 hyperactive
【医】 per-; ultra-
minim; sparklet; atom; dram; drop; scruple; tittle
【医】 microdosage; microdose; microdosis; minute dose; trace
【化】 spectrophotometry
【医】 spectrophotometry
超微量分光光度测定法(Ultra-Microvolume Spectrophotometry)是一种用于测量极微量样品(通常在0.5-2微升范围内)中核酸(如DNA、RNA)、蛋白质或其他生物分子浓度的精密分析技术。它结合了分光光度法的原理与专门设计的超微量检测系统,特别适用于珍贵或有限样本的分析。以下是其核心含义与技术特点的详细解释:
分光光度法基础
基于物质对特定波长光的吸收特性(朗伯-比尔定律),通过测量吸光度(A)定量分析样品浓度。公式表示为:
$$ A = varepsilon cdot c cdot l $$
其中 (varepsilon) 为摩尔吸光系数,(c) 为浓度,(l) 为光程长度。
超微量特性
区别于传统分光光度计(需数十至数百微升样品),该技术利用:
样品高效利用
仅需0.5–2 μL样品即可完成测量,适用于珍贵样本(如单细胞提取物、考古样本)或高通量筛选场景。
高灵敏度与准确性
快速无耗材检测
直接点样于检测表面,清洗后即可进行下一测定,无需比色皿或毛细管,减少交叉污染风险。
核酸定量与纯度评估
蛋白质分析
利用280 nm吸光度(基于色氨酸/酪氨酸吸收)或特定染料法(如BCA、Bradford)进行定量。
微流体与单细胞研究
兼容微量细胞裂解液、CRISPR编辑产物等超小体积样本的直接检测。
仪器原理与技术白皮书
Thermo Fisher Scientific. NanoDrop Microvolume Quantitation Technology.
核酸定量标准方法
Gallagher, S. R. (2011). Quantitation of Nucleic Acids with Absorption Spectroscopy. Current Protocols in Molecular Biology.
超微量技术在生物医学中的应用
Korte, A. R., et al. (2016). Microvolume Analysis in Single-Cell Proteomics. Analytical Chemistry.
核酸纯度评估指南
International Union of Biochemistry. Spectrophotometric Evaluation of Nucleic Acid Purity.
超微量分光光度测定法是一种基于物质对光吸收特性的分析技术,主要用于极微量样本的快速定量检测。以下从定义、原理、特点和应用四方面展开说明:
该方法通过测量物质在特定波长下的吸光度,利用其特有的吸收光谱对物质进行定性和定量分析。与传统分光光度法相比,其样本需求量更少(通常为微升级),适用于生物化学中微量物质的检测,如核酸、蛋白质等。
如需更完整信息,可参考、5、8、9等来源。
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