
【化】 ultramicrospectrophotometry
exceed; go beyond; overtake
【計】 hyperactive
【醫】 per-; ultra-
minim; sparklet; atom; dram; drop; scruple; tittle
【醫】 microdosage; microdose; microdosis; minute dose; trace
【化】 spectrophotometry
【醫】 spectrophotometry
超微量分光光度測定法(Ultra-Microvolume Spectrophotometry)是一種用于測量極微量樣品(通常在0.5-2微升範圍内)中核酸(如DNA、RNA)、蛋白質或其他生物分子濃度的精密分析技術。它結合了分光光度法的原理與專門設計的超微量檢測系統,特别適用于珍貴或有限樣本的分析。以下是其核心含義與技術特點的詳細解釋:
分光光度法基礎
基于物質對特定波長光的吸收特性(朗伯-比爾定律),通過測量吸光度(A)定量分析樣品濃度。公式表示為:
$$ A = varepsilon cdot c cdot l $$
其中 (varepsilon) 為摩爾吸光系數,(c) 為濃度,(l) 為光程長度。
超微量特性
區别于傳統分光光度計(需數十至數百微升樣品),該技術利用:
樣品高效利用
僅需0.5–2 μL樣品即可完成測量,適用于珍貴樣本(如單細胞提取物、考古樣本)或高通量篩選場景。
高靈敏度與準确性
快速無耗材檢測
直接點樣于檢測表面,清洗後即可進行下一測定,無需比色皿或毛細管,減少交叉污染風險。
核酸定量與純度評估
蛋白質分析
利用280 nm吸光度(基于色氨酸/酪氨酸吸收)或特定染料法(如BCA、Bradford)進行定量。
微流體與單細胞研究
兼容微量細胞裂解液、CRISPR編輯産物等超小體積樣本的直接檢測。
儀器原理與技術白皮書
Thermo Fisher Scientific. NanoDrop Microvolume Quantitation Technology.
核酸定量标準方法
Gallagher, S. R. (2011). Quantitation of Nucleic Acids with Absorption Spectroscopy. Current Protocols in Molecular Biology.
超微量技術在生物醫學中的應用
Korte, A. R., et al. (2016). Microvolume Analysis in Single-Cell Proteomics. Analytical Chemistry.
核酸純度評估指南
International Union of Biochemistry. Spectrophotometric Evaluation of Nucleic Acid Purity.
超微量分光光度測定法是一種基于物質對光吸收特性的分析技術,主要用于極微量樣本的快速定量檢測。以下從定義、原理、特點和應用四方面展開說明:
該方法通過測量物質在特定波長下的吸光度,利用其特有的吸收光譜對物質進行定性和定量分析。與傳統分光光度法相比,其樣本需求量更少(通常為微升級),適用于生物化學中微量物質的檢測,如核酸、蛋白質等。
如需更完整信息,可參考、5、8、9等來源。
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