免疫印迹英文解释翻译、免疫印迹的近义词、反义词、例句

英语翻译：

【化】 immunoblotting

分词翻译：

免疫的英语翻译：

immunity; immunization
【医】 immunity

印迹的英语翻译：

print
【化】 blotting
【医】 engram

专业解析

免疫印迹（Immunoblotting），通常特指Western Blotting（蛋白质印迹），是一种广泛应用于分子生物学、生物化学和医学研究领域的实验技术，主要用于检测复杂生物样品中特定蛋白质的存在、相对含量、分子量大小以及翻译后修饰状态。

从汉英词典角度解析：

免疫 (Miǎnyì): 对应英文"Immune"。指该技术利用抗原-抗体特异性结合反应的免疫学原理。
印迹 (Yìnjì): 对应英文"Blotting" 或"Blot"。指将分离后的生物大分子（此处为蛋白质）从凝胶转移到固相支持膜（如硝酸纤维素膜或PVDF膜）上的过程，形象地比喻为将分子“印记”在膜上。

详细技术原理与步骤：

蛋白质分离 (Protein Separation):
- 首先，含有目标蛋白质的复杂样品（如细胞裂解液、组织匀浆液）通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 进行分离。
- SDS使蛋白质变性并带上均匀负电荷，在电场作用下，蛋白质主要根据其分子量大小在凝胶中迁移，小分子量蛋白迁移快，大分子量蛋白迁移慢，从而实现分离。
转印 (Transfer/Blotting):
- 将SDS-PAGE凝胶中分离好的蛋白质条带，通过电转印或毛细作用转印到固相膜（通常是硝酸纤维素膜或PVDF膜）上。
- 此步骤是将凝胶中的蛋白质“印迹”到膜上，便于后续的抗体杂交操作，并提高检测的灵敏度和特异性。
封闭 (Blocking):
- 转印后，膜上未结合蛋白质的区域需要被封闭（常用脱脂奶粉或牛血清白蛋白BSA溶液），以防止后续步骤中抗体非特异性结合到膜上，降低背景噪音。
一抗孵育 (Primary Antibody Incubation):
- 加入针对目标蛋白质（抗原）的特异性一抗 (Primary Antibody)。一抗与膜上的目标蛋白质特异性结合。
- 这是“免疫”反应的核心步骤，体现了抗原-抗体的高度特异性识别。
二抗孵育 (Secondary Antibody Incubation):
- 洗去未结合的一抗后，加入标记有报告分子（如辣根过氧化物酶HRP、碱性磷酸酶AP或荧光基团）的二抗 (Secondary Antibody)。
- 二抗能特异性识别并结合一抗（例如，如果一抗是兔源的，则使用抗兔的二抗）。二抗上的标记物用于后续的信号检测。
检测 (Detection):
- 洗去未结合的二抗后，根据二抗标记的报告分子选择相应的检测方法：
  - 酶标记 (HRP/AP): 加入底物（如ECL化学发光底物、NBT/BCIP显色底物），产生可检测的化学发光信号或颜色沉淀。
  - 荧光标记: 使用荧光扫描仪直接检测荧光信号。
- 最终在膜的相应位置显示出代表目标蛋白质的条带信号。

核心应用：

检测特定蛋白质的表达：确认某种蛋白质在特定细胞、组织或条件下是否存在及其表达水平高低。
确定蛋白质分子量：通过与已知分子量标准品（Marker）对比，估算目标蛋白质的分子量。
分析蛋白质翻译后修饰：如磷酸化、糖基化等（常需使用修饰特异性抗体）。
抗体特异性验证：验证抗体是否能特异性识别目标蛋白。
疾病诊断与生物标志物研究：在临床检验和基础研究中用于检测疾病相关蛋白。

免疫印迹（Western Blotting）是一种结合了凝胶电泳分离蛋白质的能力和抗原-抗体特异性免疫反应的高灵敏度检测技术。其名称“免疫印迹”精确地概括了该技术的两个关键特征：“免疫”指依赖抗体进行特异性识别，“印迹”指将蛋白质从凝胶转移到固相膜的过程。它是生命科学研究中不可或缺的蛋白质分析工具。

权威参考来源：

《分子克隆实验指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual) - 被誉为分子生物学领域的“圣经”，详细阐述了Western Blotting的原理和标准操作流程。 (来源： Cold Spring Harbor Laboratory Press)
美国国立卫生研究院 (NIH) - National Institute of Child Health and Human Development (NICHD) - 其官方网站或相关研究部门常提供标准的实验技术方案，包括Western Blotting。 (来源： https://www.nichd.nih.gov)
《蛋白质技术手册》(The Protein Protocols Handbook) - 专注于蛋白质研究技术的实用手册，包含Western Blotting的详细步骤和优化方案。 (来源： Springer Nature)
生物通 (Bioon) 或生物谷 (Bioon) - 国内知名的生命科学门户网站，提供技术专题、实验方法库，包含Western Blotting的原理介绍和常见问题解答。 (来源： Bioon.com / Bioon.com.cn)

网络扩展解释

免疫印迹（Western blotting）是一种结合凝胶电泳与抗体特异性结合的蛋白质检测技术，主要用于鉴定特定蛋白质的存在、分子量及半定量分析。以下是其核心内容的综合解释：

1.定义与原理

定义：免疫印迹又称蛋白质印迹（Western blotting），通过抗原-抗体特异性反应检测复杂样本中的目标蛋白。其结合了SDS-PAGE电泳的高分辨力与固相免疫的高灵敏度。
原理：利用电泳分离蛋白质后，将蛋白转移到固相膜（如硝酸纤维素膜），再依次与一抗、标记二抗结合，最终通过显色或荧光信号检测目标蛋白。

2.主要步骤

电泳分离：使用SDS-PAGE将蛋白质按分子量分离。
转膜：将分离的蛋白质转移到固相膜上，便于后续抗体反应。
封闭：用牛血清蛋白或脱脂奶粉封闭膜上的非特异性结合位点。
抗体孵育：先用特异性一抗识别目标蛋白，再用酶或荧光标记的二抗结合一抗。
信号检测：通过化学发光或显色底物显示目标蛋白条带。

3.技术特点

高特异性：抗体仅与目标蛋白结合，减少交叉反应。
灵敏度高：可检测低至皮克（pg）级别的蛋白。
半定量分析：通过条带灰度值对比估算蛋白表达量。

4.应用领域

疾病诊断：如HIV抗体检测、自身免疫病标志物分析。
基础研究：分析基因表达产物、蛋白质修饰及相互作用。
药物开发：验证药物对靶蛋白的影响，或制备特异性抗体用于疫苗研发。

补充说明

与Southern/Northern blot的区别：免疫印迹针对蛋白质，后两者分别检测DNA和RNA。
术语统一性：免疫印迹与Western blotting（WB）为同一技术，无本质区别。

如需更详细的实验操作或案例，来源。