
【化】 radioimmunoassay; RIA
放射免疫測定(Radioimmunoassay, RIA)是一種結合了放射性同位素标記技術與免疫學抗原-抗體特異性反應的高靈敏度定量分析方法。其核心原理是利用放射性标記的抗原(*Ag*)與待測樣本中的未标記抗原(Ag)競争性結合有限數量的特異性抗體(Ab),通過測量标記抗原-抗體複合物(Ag-Ab)的放射性強度,間接推算出待測抗原的濃度。該技術由Rosalyn Yalow和Solomon Berson于1959年首創,并因此獲得1977年諾貝爾生理學或醫學獎。
競争性結合反應
反應體系中包含固定量的放射性标記抗原(Ag)、有限量的特異性抗體(Ab)及待測樣本中的未标記抗原(Ag)。兩者競争結合抗體的結合位點,反應遵循質量作用定律: $$ Ag + Ag^ + Ab rightleftharpoons Ag-Ab + Ag^-Ab $$ 當待測抗原濃度越高時,Ag-Ab複合物的放射性信號越低,形成負相關曲線。
分離與測量
反應平衡後,采用沉澱法(如聚乙二醇)、固相吸附法或雙抗體法等分離結合态(Ag-Ab)與遊離态(Ag**)标記物。通過γ計數器或液體閃爍儀測量沉澱物的放射性計數(CPM)。
标準曲線繪制
使用已知濃度的标準品替代待測樣本,建立放射性計數與抗原濃度的對數函數關系。待測樣本濃度通過标準曲線插值計算得出。
對RIA的技術原理及臨床标準化流程有詳細指南(來源:snmmi.org)。
Yalow和Berson的原始論文奠定了理論基礎(來源:Clinical Chemistry Journal)。
發布免疫分析質量控制規範,涵蓋RIA方法學驗證(來源:WHO IVD Guidelines)。
注:當前放射免疫測定已部分被酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等非放射性方法替代,但其高靈敏度仍使其在特定領域(如小分子激素檢測)不可替代。
放射免疫測定(Radioimmunoassay, RIA)是一種結合放射性同位素檢測技術與抗原抗體特異性反應的體外微量物質定量分析方法。以下是其核心要點:
放射免疫測定基于競争性結合反應:用放射性同位素标記的抗原(标記抗原)與待測樣本中的未标記抗原共同競争結合有限量的特異性抗體。标記抗原-抗體複合物的放射性強度與待測抗原濃度成反比。通過測量複合物的放射性,可繪制标準曲線并計算待測物濃度。
若需進一步了解操作細節或曆史發展,、及的完整内容。
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