
【化】 radioimmunoassay; RIA
放射免疫测定(Radioimmunoassay, RIA)是一种结合了放射性同位素标记技术与免疫学抗原-抗体特异性反应的高灵敏度定量分析方法。其核心原理是利用放射性标记的抗原(*Ag*)与待测样本中的未标记抗原(Ag)竞争性结合有限数量的特异性抗体(Ab),通过测量标记抗原-抗体复合物(Ag-Ab)的放射性强度,间接推算出待测抗原的浓度。该技术由Rosalyn Yalow和Solomon Berson于1959年首创,并因此获得1977年诺贝尔生理学或医学奖。
竞争性结合反应
反应体系中包含固定量的放射性标记抗原(Ag)、有限量的特异性抗体(Ab)及待测样本中的未标记抗原(Ag)。两者竞争结合抗体的结合位点,反应遵循质量作用定律: $$ Ag + Ag^ + Ab rightleftharpoons Ag-Ab + Ag^-Ab $$ 当待测抗原浓度越高时,Ag-Ab复合物的放射性信号越低,形成负相关曲线。
分离与测量
反应平衡后,采用沉淀法(如聚乙二醇)、固相吸附法或双抗体法等分离结合态(Ag-Ab)与游离态(Ag**)标记物。通过γ计数器或液体闪烁仪测量沉淀物的放射性计数(CPM)。
标准曲线绘制
使用已知浓度的标准品替代待测样本,建立放射性计数与抗原浓度的对数函数关系。待测样本浓度通过标准曲线插值计算得出。
对RIA的技术原理及临床标准化流程有详细指南(来源:snmmi.org)。
Yalow和Berson的原始论文奠定了理论基础(来源:Clinical Chemistry Journal)。
发布免疫分析质量控制规范,涵盖RIA方法学验证(来源:WHO IVD Guidelines)。
注:当前放射免疫测定已部分被酶联免疫吸附试验(ELISA)等非放射性方法替代,但其高灵敏度仍使其在特定领域(如小分子激素检测)不可替代。
放射免疫测定(Radioimmunoassay, RIA)是一种结合放射性同位素检测技术与抗原抗体特异性反应的体外微量物质定量分析方法。以下是其核心要点:
放射免疫测定基于竞争性结合反应:用放射性同位素标记的抗原(标记抗原)与待测样本中的未标记抗原共同竞争结合有限量的特异性抗体。标记抗原-抗体复合物的放射性强度与待测抗原浓度成反比。通过测量复合物的放射性,可绘制标准曲线并计算待测物浓度。
若需进一步了解操作细节或历史发展,、及的完整内容。
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