
【機】 ammonium sulphate precipitation
硫酸铵沉澱(Ammonium Sulfate Precipitation)的漢英詞典釋義
一、術語定義
二、作用原理
鹽析效應(Salting Out)
高濃度硫酸铵電離出大量離子(NH₄⁺和SO₄²⁻),與蛋白質争奪水分子,破壞其水化層,同時增加溶液極性、降低介電常數,導緻蛋白質疏水區域暴露并聚集沉澱。
公式表達飽和度與溶解度關系:
$$ log S = log S_0 - K_s cdot I
$$
其中 ( S ) 為當前溶解度,( S_0 ) 為初始溶解度,( K_s ) 為鹽析常數,( I ) 為離子強度。
分級沉澱(Fractional Precipitation)
通過控制硫酸铵飽和度(如30%-80%),選擇性沉澱不同溶解度的蛋白質,實現粗分離。
三、操作流程與關鍵參數
飽和度計算
常用凱氏公式(Cohn Equation)計算飽和溶液添加量:
$$ V = V_0 frac{S_2 - S_1}{1 - S_2}
$$
( V ) 為需添加的飽和硫酸铵體積,( V_0 ) 為樣品初始體積,( S_1 )、( S_2 ) 為初始和目标飽和度。
溫度與pH控制
四、應用場景
五、優缺點對比
優勢 | 局限性 |
---|---|
成本低、操作簡單 | 分辨率低于色譜法 |
兼容大體積樣品 | 需後續脫鹽步驟 |
對蛋白質活性影響較小 | 鹽殘留可能幹擾下遊分析 |
權威參考文獻
趙永芳主編,高等教育出版社,2015年。
第7章詳述鹽析法及飽和度計算。
Ammonium Sulfate Precipitation Protocol(需機構訪問權限)
标準操作指南及優化方案。
美國國家生物技術信息中心(NCBI)技術手冊。
注:術語“硫酸氨”應為“硫酸铵”(Ammonium Sulfate),系常見筆誤;實際應用中需區分“氨”(Ammonia)與“铵”(Ammonium)的化學特性差異。
硫酸铵沉澱是一種利用硫酸铵溶液分離和純化蛋白質的常用技術,以下是其核心要點:
硫酸铵沉澱(Ammonium Sulfate Precipitation)指通過調節不同濃度的硫酸铵溶液,使目标蛋白質從溶液中析出的分離方法。該技術特别適用于免疫球蛋白的粗提,是生物化學和免疫學實驗中基礎的操作手段。
該方法因操作簡便、成本低,在實驗室預處理和粗純化中廣泛應用,但對高純度需求需結合層析等技術進一步純化。
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