密度梯度电泳法英文解释翻译、密度梯度电泳法的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 density gra***nt electrophoresis
分词翻译:
密度梯度电泳的英语翻译:
【化】 density gra***nt electrophoresis
法的英语翻译:
dharma; divisor; follow; law; standard
【医】 method
【经】 law
专业解析
密度梯度电泳法(Density Gradient Electrophoresis)是一种基于电场作用下,带电粒子在预先形成的密度梯度介质中迁移率差异进行分离和分析的高分辨率电泳技术。其核心原理结合了电泳的电荷分离特性与密度梯度的沉降或浮力稳定作用。
原理与过程:
- 梯度介质建立:在电泳支持物(如离心管或色谱柱)中形成连续的、稳定的密度梯度溶液。常用介质包括蔗糖、甘油、氯化铯(CsCl)或碘克沙醇(Iodixanol)等。梯度可通过梯度混合器或超速离心预形成。带电粒子(如蛋白质、核酸、病毒颗粒、细胞器等)被小心加样到梯度顶部。
- 电泳分离:施加电场后,带电粒子依据其电荷(质荷比)、大小、形状在梯度介质中迁移。迁移过程中,粒子会遇到逐渐增大的介质密度。
- 平衡与分离:粒子迁移至其自身密度与周围介质密度相等的等密度点(isopycnic point)时,净沉降力为零,迁移停止。不同粒子因密度差异最终停留在梯度中不同的密度层位置,形成分离区带。
关键特点:
- 高分辨率:能分离密度差异微小的粒子(如不同构象的DNA、蛋白质复合物、亚细胞器)。
- 稳定性:密度梯度可防止对流和扩散干扰,维持分离区带的锐利。
- 等密度聚焦:最终分离基于粒子本身的密度(等密度点),而非仅依赖于迁移率。
- 温和条件:适用于分离对pH、离子强度敏感的生物大分子和颗粒。
主要应用:
- 核酸分析:分离不同构象的DNA(如超螺旋、开环、线性DNA)、RNA分子及DNA-蛋白质复合物。
- 蛋白质研究:分离脂蛋白亚类、膜蛋白复合物、蛋白质聚集体。
- 病毒与亚细胞器纯化:分离、纯化病毒颗粒、线粒体、溶酶体、核糖体等细胞器。
- 大分子复合物表征:分析大分子组装体的密度和组成。
优势与局限:
- 优势:分辨率高,分离条件温和,可同时分离多种组分,适用于制备和分析。
- 局限:操作相对复杂耗时,需要特殊设备(如梯度形成装置、超速离心机),样品容量通常较小。
汉英对照关键术语:
- 密度梯度电泳法 - Density Gradient Electrophoresis
- 密度梯度 - Density Gradient
- 等密度点 / 等密度区带 - Isopycnic Point / Isopycnic Banding
- 迁移率 - Mobility
- 带电粒子 - Charged Particle
- 分辨率 - Resolution
- 区带分离 - Zone Separation
参考资料来源:
- 《生物化学与分子生物学实验技术》高等教育出版社 - 详细阐述了密度梯度电泳的原理与操作流程。
- National Institutes of Health (NIH), Laboratory Methods - Electrophoresis Techniques Overview - 概述了包括密度梯度电泳在内的多种电泳技术原理与应用。
- 《蛋白质组学方法与应用》科学出版社 - 介绍了密度梯度电泳在蛋白质复合物分离中的应用实例。
- Current Protocols in Cell Biology, Chapter 3: Subcellular Fractionation and Isolation of Organelles - 提供了使用密度梯度电泳/离心分离细胞器的标准实验方案。
网络扩展解释
密度梯度电泳法是一种基于电场作用分离带电分子的技术,其核心在于利用密度梯度凝胶的孔径连续变化特性,实现更精细的分子筛分效果。以下是详细解释:
1.基本定义
密度梯度电泳法(Density Gradient Electrophoresis)通过制备具有连续浓度梯度的凝胶介质,形成孔径从大到小变化的分子筛结构。带电分子在电场中迁移时,会因凝胶孔径差异而受到不同阻力,从而实现按分子量或形状的高效分离。
2.原理与结构特点
- 梯度凝胶:凝胶浓度呈连续梯度分布,导致孔径自上而下逐渐减小(如从大孔径过渡到小孔径)。
- 分子筛效应:分子量较大的物质在较大孔径区域迁移较快,但进入小孔径区域后受阻明显;分子量较小的物质则能更顺畅通过,最终形成分离条带。
3.技术优势
- 高分辨率:适用于含多种蛋白质或核酸的复杂样品,可同时分离分子量差异较大的组分。
- 灵活性:通过调整梯度范围,可适应不同分子量范围的分离需求。
4.应用领域
主要用于生物化学研究,如蛋白质混合物的分离、DNA片段分析等。其高分辨率特性在疾病标志物检测和药物研发中尤为重要。
补充说明
普通电泳依赖单一凝胶浓度,分离范围有限;而密度梯度法通过动态孔径变化扩展了分离能力。该方法也被称为“分子筛电泳”,因其机制类似于筛分不同粒径颗粒的过程。
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