
【化】 dark-field microscope
暗场显微镜(Dark-field Microscopy)是一种基于光学散射原理的显微成像技术,通过特殊照明方式使样本在暗背景中呈现明亮影像。其核心原理是采用环形挡板或空心圆锥形照明光束,使直射光无法进入物镜,仅允许样本表面散射的光线被捕获,从而实现高对比度成像。
该技术由德国物理学家朱利叶斯·理查德·佩特里于19世纪末改良完善,现主要应用于微生物学、材料科学和纳米技术领域。根据《现代显微技术手册》(Springer, 2020版)记载,暗场显微镜对观察未染色样本(如活体细菌、血细胞)和亚波长结构(如金属纳米颗粒)具有显著优势,分辨率可达200纳米以下。
美国国立生物技术信息中心(NCBI)的实验指南指出,该设备配置需满足两个关键参数:数值孔径(NA)低于0.7的聚光镜,以及匹配的物镜数值孔径。这种配置可确保入射光以大于物镜接收角度的斜射方式照射样本,形成典型"暗场效应"。目前国际标准化组织(ISO 19056:2020)已将其纳入显微成像设备规范体系。
暗场显微镜(Dark-field Microscope)是一种通过特殊照明技术增强透明或微小样本对比度的光学显微镜。其核心原理是阻挡直射光,仅利用样本散射、衍射或反射的斜射光成像,形成明亮样本与暗背景的高对比度效果。
照明技术
暗场显微镜采用倾斜照明,通过聚光镜中的中央挡光片或抛物面聚光器阻挡直射光,仅允许光线以一定角度照射样本。样本的细微结构(如细胞、微粒)会散射或反射光线,这些散射光进入物镜形成图像,而未被散射的直射光则被排除,导致背景呈黑色。
这一过程类似于丁达尔效应(如暗室中斜射光线下可见灰尘颗粒)。
光学配置
关键部件包括暗场聚光镜、高数值孔径物镜及准直光源。部分设计中还会使用光学圆片控制光线方向。
如需更完整的原理图示或操作示例,可参考搜狗百科或百度文库的详细说明。
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