
【化】 isoelectric separation
【化】 isoelectric point
【医】 I. P.; isoelectric points
part; detach; dispart; dissociate; divorce from; secede; segregate; split
【计】 decatenation; deconcatenation; decouple; kick-off; kick-out
【化】 isolation; segregation; separation
【医】 abruptio; ap-; aphoresis; apo-; chorisis; detachment; dia-; diaeresis
diastasis; disassociation; disconnect; dissociation; divarication
isolate; isolation; segregation; separation; sequester; sequestration
solution; sublatio; sublation
【经】 separate
等电点分离(Isoelectric Point Separation)是一种基于生物分子在特定pH环境下电荷特性差异的分离技术。其核心原理是:当溶液的pH值等于目标分子(如蛋白质)的等电点(pI)时,分子表面净电荷为零,此时溶解度最低,可通过离心或电泳实现分离。
具体实施过程包含三个关键阶段:
该技术在生物医药领域具有重要应用价值:美国药典42版收录了等电聚焦电泳作为单克隆抗体纯度检测标准方法,其分辨率可达0.02pH单位差异。需注意环境温度需控制在4-10℃以防止蛋白质变性(《蛋白质分离技术实验指南》第5章)。
等电点分离是一种基于物质等电点特性进行分离纯化的生物化学方法,主要应用于蛋白质、氨基酸等两性电解质的分离。以下是详细解释:
等电点(pI)指溶液pH达到某一特定值时,两性物质(如氨基酸或蛋白质)的阳离子与阴离子解离趋势相等,整体呈电中性状态。此时分子以兼性离子形式存在,净电荷为零。
溶解度最低点
在等电点时,蛋白质分子因缺乏净电荷导致分子间排斥力减弱,容易聚集形成沉淀,此时溶解度达到最低值。
差异性分离
不同蛋白质具有不同的等电点(如白蛋白pI≈4.9,血红蛋白pI≈6.8)。通过调节溶液pH至目标蛋白的等电点,可选择性沉淀目标物,而其他蛋白仍保持溶解状态。
需结合缓冲液离子强度控制,避免过度聚集引起的变性。实际应用中常与层析技术(如等电聚焦电泳)联用以提高分辨率。
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