
【化】 isoelectric separation
【化】 isoelectric point
【醫】 I. P.; isoelectric points
part; detach; dispart; dissociate; divorce from; secede; segregate; split
【計】 decatenation; deconcatenation; decouple; kick-off; kick-out
【化】 isolation; segregation; separation
【醫】 abruptio; ap-; aphoresis; apo-; chorisis; detachment; dia-; diaeresis
diastasis; disassociation; disconnect; dissociation; divarication
isolate; isolation; segregation; separation; sequester; sequestration
solution; sublatio; sublation
【經】 separate
等電點分離(Isoelectric Point Separation)是一種基于生物分子在特定pH環境下電荷特性差異的分離技術。其核心原理是:當溶液的pH值等于目标分子(如蛋白質)的等電點(pI)時,分子表面淨電荷為零,此時溶解度最低,可通過離心或電泳實現分離。
具體實施過程包含三個關鍵階段:
該技術在生物醫藥領域具有重要應用價值:美國藥典42版收錄了等電聚焦電泳作為單克隆抗體純度檢測标準方法,其分辨率可達0.02pH單位差異。需注意環境溫度需控制在4-10℃以防止蛋白質變性(《蛋白質分離技術實驗指南》第5章)。
等電點分離是一種基于物質等電點特性進行分離純化的生物化學方法,主要應用于蛋白質、氨基酸等兩性電解質的分離。以下是詳細解釋:
等電點(pI)指溶液pH達到某一特定值時,兩性物質(如氨基酸或蛋白質)的陽離子與陰離子解離趨勢相等,整體呈電中性狀态。此時分子以兼性離子形式存在,淨電荷為零。
溶解度最低點
在等電點時,蛋白質分子因缺乏淨電荷導緻分子間排斥力減弱,容易聚集形成沉澱,此時溶解度達到最低值。
差異性分離
不同蛋白質具有不同的等電點(如白蛋白pI≈4.9,血紅蛋白pI≈6.8)。通過調節溶液pH至目标蛋白的等電點,可選擇性沉澱目标物,而其他蛋白仍保持溶解狀态。
需結合緩沖液離子強度控制,避免過度聚集引起的變性。實際應用中常與層析技術(如等電聚焦電泳)聯用以提高分辨率。
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