
【化】 membrane chromatography
film; membrane; theca; velamen; velum
【化】 membrane
【医】 coat; envelope; film; lemma; membranae membranae; membranae membrane
panniculus; theca; thecae; tunic; tunica; velamen; velamenta
velamentum
【化】 chromatography
【医】 chromatography
膜色谱法(Membrane Chromatography),又称膜层析或膜分离色谱,是一种结合了膜分离技术和色谱分离原理的高效生物分离纯化技术。与传统色谱法使用颗粒状填料不同,膜色谱法采用具有特定功能基团修饰的微孔膜或中空纤维膜作为分离介质(固定相)。
分离机制
基于目标分子(如蛋白质、核酸)与膜表面功能基团(如离子交换基团、亲和配体、疏水基团)之间的特异性相互作用(如静电作用、疏水作用、生物亲和作用)。混合物在压力驱动下流经膜孔时,目标物被选择性地吸附在膜上,杂质则穿透膜孔流出,随后通过改变洗脱条件(如pH值、离子强度)回收目标物。
技术优势
亲和膜色谱(Affinity Membrane Chromatrosis)
膜表面固定特异性配体(如Protein A用于抗体纯化、金属螯合物用于组氨酸标签蛋白)。
应用实例:单克隆抗体(mAb)的捕获精制,重组蛋白分离。
离子交换膜色谱(Ion Exchange Membrane Chromatography)
通过阴/阳离子交换基团(如DEAE、SP)吸附带相反电荷的分子。
应用实例:疫苗纯化中去除宿主细胞DNA,质粒DNA精制。
疏水作用膜色谱(Hydrophobic Interaction Membrane Chromatography)
利用高盐条件下目标物疏水区域与膜介质的结合。
应用实例:单抗聚合物的去除。
典型系统包括:
操作步骤:
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膜色谱法,通常指细胞膜色谱法(Cell Membrane Chromatography, CMC),是一种结合高效液相色谱、细胞生物学和受体药理学的技术,主要用于研究药物与细胞膜及膜受体的相互作用。以下从定义、原理、应用及优势三方面详细解释:
细胞膜色谱法以活性组织细胞膜为固定相,将含特定受体的细胞膜固定在硅胶等载体表面,形成细胞膜固定相(CMSP)。通过液相色谱技术模拟药物在体内与膜受体的动态结合过程,分析药物与受体的亲和力及作用机制。其核心假设是:药物与受体间存在特异性结合,且结合具有可逆性、立体选择性和饱和性(如所述)。
与传统方法相比,CMC的优势包括:
细胞膜色谱法通过生物亲和色谱技术,为药物研发提供了一种接近生理环境的体外研究模型,尤其在天然药物活性成分筛选领域具有重要价值。如需进一步了解技术细节,可参考、3、4中提到的文献来源。
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