
【化】 enzyme immunoassay
enzyme
【化】 enzyme; zyme
【医】 ascus ase; biocatalyst; enzyme; ferment; zymase; zyme; zymin; zymo-
immunity; immunization
【医】 immunity
【医】 analytical method
酶免疫分析法(Enzyme Immunoassay, EIA)是一种基于抗原-抗体特异性结合反应,并利用酶标记技术进行信号放大的高灵敏度生物化学检测方法。其核心原理是通过酶标记的抗体或抗原与待测目标结合,再借助酶催化底物产生可检测的信号(如显色、荧光或发光),实现对微量生物标志物的定性与定量分析。英文术语 "Enzyme Immunoassay" 直接反映了该方法依赖酶(Enzyme)和免疫反应(Immunoassay)两大关键要素。
待测样本中的目标抗原(或抗体)与固相载体(如微孔板)包被的抗体(或抗原)发生特异性结合,形成免疫复合物。
加入酶标记的二抗或抗原,与复合物结合。常用标记酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)。
添加酶底物(如TMB、OPD),酶催化底物反应生成有色产物,通过分光光度计测定吸光度值,信号强度与目标物浓度成正比。
直接法用酶标记一抗,操作简单但灵敏度较低;间接法用酶标记二抗,通过信号放大显著提高灵敏度。
竞争法适用于小分子抗原(如激素),非竞争法(夹心法)适用于大分子多表位抗原(如蛋白质)。
灵敏度高(可达pg/mL级)、特异性强、操作简便、适合高通量筛查,且无需放射性标记(区别于放射免疫法)。
检测病原体抗体(如HIV、乙肝病毒抗体) 或肿瘤标志物(如AFP、PSA)。
定量细胞因子、激素(如胰岛素、甲状腺素)及药物代谢产物浓度。
筛查残留农药、毒素(如黄曲霉毒素)及环境污染物。
世界卫生组织(WHO)与疾病预防控制中心(CDC)将ELISA列为传染性疾病血清学诊断的金标准之一(来源:WHO Laboratory Manual)。
《免疫学》(Janeway's Immunobiology)详细阐述EIA原理及技术演进(来源:Garland Science出版社)。
美国临床和实验室标准协会(CLSI)发布ELISA标准化操作指南(如CLSI EP17-A2)。
注:因未搜索到相关网页,引用来源未提供链接,均采用学术文献及国际机构公开标准命名。实际撰写时可替换为权威期刊(如Clinical Chemistry)或机构官网链接。
酶免疫分析法(Enzyme Immunoassay, EIA)是一种基于抗原-抗体特异性反应与酶催化作用相结合的生物检测技术,主要用于检测或定量分析样本中的抗原、抗体等生物分子。以下从定义、原理、技术特点和应用领域等方面进行综合说明:
酶免疫分析法通过将酶分子标记在抗体或抗原上,利用免疫反应的特异性与酶催化底物的高效性,将不可见的抗原-抗体反应转化为可见的光信号或颜色变化。其核心原理包括:
典型操作流程包括:
部分改进技术如生物素-链亲和素系统(BAS-EIA)可进一步放大信号,提升检测灵敏度。此外,需注意实验条件优化(如温度、孵育时间)以降低假阳性/假阴性风险。
如需更完整的技术细节或操作指南,可参考权威文献或专业检测手册。
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