密度梯度離心法英文解釋翻譯、密度梯度離心法的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【化】 density gra***nt centrifugation
分詞翻譯:
密度梯度離心的英語翻譯:
【機】 sensity gra***nt centrifugation
法的英語翻譯:
dharma; divisor; follow; law; standard
【醫】 method
【經】 law
專業解析
密度梯度離心法(Density Gradient Centrifugation)是一種基于物質密度差異的分離技術,廣泛應用于生物化學和分子生物學領域。其核心原理是通過離心力驅動樣品在預先形成的密度梯度介質中沉降,不同密度的成分最終停留在與其自身密度相等的梯度層,從而實現分離。
定義與基本原理
密度梯度離心法在中文中又稱“密度梯度離心技術”,對應的英文術語為“Density Gradient Centrifugation”。該方法通過蔗糖、氯化铯(CsCl)或碘克沙醇等介質形成連續的密度梯度,在高速離心過程中,目标顆粒(如DNA、蛋白質或細胞器)根據密度差異分層。例如,DNA分子在氯化铯梯度中會形成特定條帶,這一現象由Meselson和Stahl于1958年首次用于證明DNA的半保留複制機制。
技術分類與操作步驟
- 速率區帶離心(Rate-Zonal Centrifugation):基于顆粒大小和形狀的差異進行分離,通常采用低濃度蔗糖梯度,適用于分離核糖體、病毒顆粒等。
- 等密度離心(Isopycnic Centrifugation):依賴顆粒自身密度,在離心平衡時停留于密度匹配的梯度層,常用于質粒DNA純化。
典型應用場景
- 核酸分離:如從細胞裂解液中提取質粒DNA或RNA;
- 亞細胞結構分離:分離線粒體、溶酶體等細胞器;
- 病毒純化:通過梯度離心去除宿主細胞碎片,獲得高純度病毒顆粒。
參考文獻
- Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press.
- Meselson, M., & Stahl, F. W. (1958). The replication of DNA in Escherichia coli. Proceedings of the National Academy of Sciences, 44(7), 671-682.
- Alberts, B., et al. (2002). Molecular Biology of the Cell (4th ed.). Garland Science.
- Graham, J. M. (2001). Biological Centrifugation. Springer Lab Manuals.
網絡擴展解釋
密度梯度離心法是一種通過介質形成連續或不連續密度梯度,利用顆粒的密度或沉降系數差異進行分離的技術。以下是詳細解釋:
1.原理與操作
- 核心機制:離心時,顆粒在密度梯度介質中因沉降速度或浮力差異分層。當顆粒密度大于介質時會沉降,反之則上浮,最終在平衡位置形成區帶。
- 介質選擇:常用蔗糖、甘油等惰性物質預先形成梯度,介質的最大密度需小于所有樣品顆粒密度。
- 操作流程:樣品鋪于梯度液表面,離心後不同顆粒按特性分布于特定區域,形成清晰區帶。
2.主要類型
- 速率區帶離心:根據顆粒大小和沉降速度差異分離,適用于沉降系數相近但密度不同的顆粒(如核酸、蛋白質)。
- 等密度離心:依賴顆粒自身密度差異,在離心平衡時聚集于與自身密度相同的介質區域(如分離DNA片段)。
3.應用領域
- 分離核酸、蛋白質、核糖體亞基等生物大分子。
- 用于細胞器純化(如線粒體、溶酶體)及病毒顆粒分離。
4.優缺點對比
- 優點:分辨率高,可同時分離多個組分;減少交叉污染。
- 缺點:需預先制備梯度介質,操作複雜;耗時較長。
5.與差速離心法的區别
- 差速離心法通過多次改變離心力分離顆粒,適用于大小差異顯著的物質;密度梯度離心法僅需一次離心,依賴密度或沉降系數差異。
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分類
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