免疫印迹法英文解釋翻譯、免疫印迹法的近義詞、反義詞、例句

英語翻譯：

【化】 immunoblotting

分詞翻譯：

免疫的英語翻譯：

immunity; immunization
【醫】 immunity

印迹的英語翻譯：

print
【化】 blotting
【醫】 engram

法的英語翻譯：

dharma; divisor; follow; law; standard
【醫】 method
【經】 law

專業解析

免疫印迹法（Western Blot），又稱蛋白質印迹法（Western Blotting），是一種廣泛應用于分子生物學、生物化學和醫學研究領域的實驗技術，主要用于檢測複雜生物樣品中特定蛋白質的存在、相對含量及分子量大小。其名稱“Western”是相對于檢測DNA的“Southern Blotting”（Southern印迹法）和檢測RNA的“Northern Blotting”（Northern印迹法）而來，體現了術語的沿革。

技術原理與核心步驟：

蛋白質分離（Separation by Electrophoresis）：樣品中的蛋白質混合物首先通過十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）進行分離。SDS使蛋白質變性并帶上負電荷，在電場作用下，蛋白質主要依據分子量大小在凝膠中遷移，小分子量蛋白質遷移速度快，大分子量蛋白質遷移速度慢，從而實現分離。
轉膜（Transfer to Membrane）：将凝膠中分離好的蛋白質條帶通過電轉印或毛細作用轉移到固相支持物（通常是硝酸纖維素膜或PVDF膜）上。此步驟旨在将蛋白質從凝膠固定到膜上，便于後續的抗體雜交操作。
封閉（Blocking）：轉膜後，用非特異性蛋白質溶液（如脫脂奶粉或牛血清白蛋白BSA）封閉膜上未結合蛋白質的空隙位點。這一步至關重要，可防止後續步驟中抗體非特異性結合到膜上，降低背景噪音。
一抗孵育（Primary Antibody Incubation）：加入針對目标蛋白質（抗原）的特異性一抗（Primary Antibody）。一抗與膜上的目标蛋白質特異性結合。孵育後洗去未結合的一抗。
二抗孵育（Secondary Antibody Incubation）：加入與一抗種屬來源相匹配的、偶聯有報告酶（如辣根過氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP）的二抗（Secondary Antibody）。二抗能特異性識别并結合一抗。孵育後洗去未結合的二抗。
檢測（Detection）：加入該報告酶對應的底物。在酶的作用下，底物發生化學反應，産生可檢測的信號。常用的檢測方法包括：
- 化學發光法（Chemiluminescence）：底物反應産生光信號，通過X光膠片或成像系統捕獲。
- 顯色法（Chromogenic Detection）：底物反應産生有色沉澱，肉眼或掃描儀可見。
- 熒光法（Fluorescence Detection）：使用偶聯熒光基團的二抗，通過熒光掃描儀檢測。

核心價值與應用：

免疫印迹法因其特異性高（依賴于抗原-抗體特異性結合）、靈敏度高（通過信號放大系統）和能提供分子量信息等優點，成為生命科學研究中不可或缺的工具，主要用于：

特定蛋白質的檢測與鑒定：确認樣品中是否存在目标蛋白質。
蛋白質表達水平的半定量分析：通過比較條帶信號的強弱，分析目标蛋白質在不同樣品（如正常與病變組織、處理與未處理細胞）中的相對表達量變化。
蛋白質分子量測定：通過與已知分子量标準品（Marker）對比，估算目标蛋白質的分子量，也可用于檢測蛋白質翻譯後修飾（如糖基化、磷酸化）引起的分子量變化。
抗體特異性驗證：驗證新制備或購買的抗體是否能特異性識别目标蛋白質。

權威參考文獻來源：

《分子克隆實驗指南》（Molecular Cloning: A Laboratory Manual）：由冷泉港實驗室出版社出版，被譽為分子生物學領域的“聖經”，詳細闡述了包括Western Blot在内的各種基礎分子生物學技術原理與操作步驟。來源：Cold Spring Harbor Laboratory Press.
《抗體技術實驗指南》（Using Antibodies: A Laboratory Manual）：同樣由冷泉港實驗室出版社出版，專注于抗體相關技術，對免疫印迹法的優化和問題解決有深入指導。來源：Cold Spring Harbor Laboratory Press.
《自然實驗手冊》（Nature Protocols）：國際頂級期刊《自然》（Nature）旗下的線上實驗方法庫，提供大量經過同行評議的、詳細的Western Blot實驗方案。來源：Nature Portfolio.
《生物化學與分子生物學方法》（Methods in Biochemistry and Molecular Biology）：專業叢書系列，收錄衆多權威學者撰寫的特定技術方法章節，包括免疫印迹法。來源：Springer Nature / Academic Press.
美國國立衛生研究院（NIH）相關技術資源：NIH下屬機構（如NCI, NIAID等）的官方網站常提供标準化的實驗操作規程（SOP），包含Western Blot。來源：National Institutes of Health (NIH).

網絡擴展解釋

免疫印迹法（Western blotting）是一種結合凝膠電泳與免疫化學技術的蛋白質檢測方法，具有高分辨率、高特異性和敏感性。以下從原理、步驟、應用和特點等方面綜合解釋：

定義與原理

免疫印迹法通過電泳分離蛋白質，再将其轉移到固相膜（如硝酸纖維素膜），利用抗原-抗體特異性結合的原理，通過标記的二抗和顯色底物對目标蛋白進行定位分析。其核心是将高分辨率的SDS-PAGE電泳與免疫檢測相結合，實現對複雜樣品中特定蛋白質的定性和半定量分析。

操作步驟

SDS-PAGE電泳：
蛋白質樣本經SDS處理後帶負電荷，在聚丙烯酰胺凝膠中按分子量大小分離，分子量越小遷移越快。此階段分離結果需染色後才能肉眼觀察（如考馬斯亮藍染色）。
電轉移：
将凝膠中分離的蛋白質條帶轉移至固相膜（如硝酸纖維素膜），通常使用低電壓（100V）、大電流（1~2A）進行45分鐘轉移，确保蛋白質固定于膜上。
酶免疫定位：
依次用特異性一抗和酶标記二抗（如HRP标記抗體）孵育膜，最後加入顯色底物（如3,3-二氨基聯苯胺或4-氯-1-萘酚）使目标蛋白條帶顯色，通過條帶位置和強度判斷結果。

主要應用

醫學診斷：檢測病毒抗體（如HIV）、自身免疫疾病标志物（如系統性紅斑狼瘡的抗核抗體）。
基礎研究：分析蛋白質表達水平、分子量測定及翻譯後修飾研究。
生物技術：驗證基因工程産物的蛋白表達（如重組蛋白）。

優缺點

優點：特異性強、靈敏度高（可檢測低至pg級蛋白）、可同時分析多個樣本。
局限性：操作步驟繁瑣、耗時較長，且對抗體質量要求較高。

擴展知識

免疫印迹法名稱源于Southern blot（DNA印迹），後衍生出Northern blot（RNA印迹）和Western blot（蛋白質印迹），形成分子生物學“三大印迹技術”。

如需更詳細的技術參數或具體實驗案例，可參考來源網頁（如）。