蛋白质印迹英文解释翻译、蛋白质印迹的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 Western blot
分词翻译:
蛋白质的英语翻译:
albumin; protein
【化】 protein
【医】 albuminoid; albumoid; proteic substance
印迹的英语翻译:
print
【化】 blotting
【医】 engram
专业解析
蛋白质印迹(Western blotting)是一种广泛应用于分子生物学和医学研究的实验技术,用于检测特定蛋白质在复杂样本中的表达水平及分子量。其英文术语“Western blot”源于“Southern blot”(检测DNA)和“Northern blot”(检测RNA)的命名逻辑,由Neal Burnette于1981年首次提出。
技术原理与流程
- 凝胶电泳分离:通过SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)将蛋白质按分子量分离。
- 转膜:将凝胶中的蛋白质转移到固相载体(如硝酸纤维素膜或PVDF膜),形成“印迹”。
- 抗体结合:先后使用一抗(特异性识别目标蛋白)和二抗(标记酶或荧光基团的通用抗体)进行孵育。
- 信号检测:通过化学发光、荧光显色或比色法可视化目标蛋白条带。
核心应用领域
- 疾病诊断:用于HIV、疯牛病等传染病的抗体检测(美国CDC推荐方法)
- 癌症研究:检测癌变组织中特定蛋白标志物的表达水平
- 药物开发:验证药物对靶蛋白的调控作用
质量控制标准
国际临床化学联合会(IFCC)建议实验需包含:
- 阳性/阴性对照
- 内参蛋白(如β-actin或GAPDH)校正上样量差异
- 分子量标准品定位
该技术现已被《分子克隆实验指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual)收录为蛋白质分析的标准方法,最新技术改良包含自动化转印系统和数字成像定量分析。
网络扩展解释
蛋白质印迹(Western blot),也称免疫印迹(immunoblotting),是一种用于检测复杂样品中特定蛋白质的分子生物学技术。以下是其核心要点:
1.定义与基本原理
蛋白质印迹通过电泳分离蛋白质,再结合抗体特异性识别目标蛋白。其核心步骤包括:
- 电泳分离:利用SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)按分子量分离蛋白质。
- 转膜:将分离的蛋白质转移到固相载体(如硝酸纤维素膜或PVDF膜),便于后续抗体结合。
- 抗体检测:通过一抗(特异性结合目标蛋白)和二抗(带标记物,如酶或荧光基团)进行显色或显影。
2.实验流程
- 电泳:样品经SDS处理,消除电荷差异,仅按分子量分离。
- 转膜:通过电场或毛细作用将蛋白质从凝胶转移到膜上。
- 封闭:用脱脂奶粉或BSA封闭膜,减少非特异性结合。
- 抗体孵育:依次加入一抗和二抗,结合目标蛋白。
- 显色/显影:通过化学发光或显色底物检测信号。
3.应用场景
- 蛋白质表达分析:验证基因表达产物或疾病标志物。
- 抗体特异性验证:检测抗体与目标蛋白的结合能力。
- 定量与定性分析:结合标准品可半定量目标蛋白丰度。
4.优势与局限
- 优势:高特异性(依赖抗体)、灵敏度高(可检测微量蛋白)。
- 局限:步骤繁琐、需优化抗体条件,且剥离重复利用困难。
来源说明
若需更详细操作步骤或问题排查,可参考权威实验手册或专业平台(如和)。
分类
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