
【化】 agar diffusion
agaragar
【化】 agar; agar-agar
【医】 agal-agal; agar; agar-agar; Bengal gelatine; Chinese gelatin
Chinese moss; Japanese gelatin; Japanese isinglass; vegetable isinglass
diffuse; pervasion; proliferate; spread
【计】 scattering
【化】 scatter
【医】 diffuse; diffusion; extensioin; generalization; generalize; irradiation
琼脂扩散(Agar Diffusion)是生物实验技术中的基础方法,指利用半固态琼脂介质实现分子或颗粒定向迁移的现象。该术语由"agar"(琼脂,一种从红藻提取的多糖胶体)和"diffusion"(物质从高浓度向低浓度自发扩散的过程)组成。
在微生物学领域,琼脂扩散试验常用于评估抗菌剂效力。当含抗生素的滤纸片置于接种菌液的琼脂平板时,药物分子通过琼脂基质扩散形成浓度梯度,抑菌圈直径与药物敏感性正相关。这种标准化方法被称为Kirby-Bauer试验,被世界卫生组织纳入《临床微生物实验室基本标准》。
免疫学应用中,双向免疫扩散(Ouchterlony法)通过在琼脂凝胶中形成抗原抗体沉淀线来检测特异性反应。此技术被收录于《分子克隆实验指南》(Cold Spring Harbor Laboratory Press),用于疫苗研发中的抗原鉴定。
分子生物学层面,琼脂糖凝胶电泳利用电场驱动DNA片段在琼脂基质中迁移,分离效率遵循Fick扩散定律。迁移距离与分子量对数值呈负相关,该原理被写入《精编分子生物学实验指南》(美国科学院出版社)。
美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库显示,琼脂扩散技术已衍生出超过20种改良方案,包括:径向免疫扩散法(Mancini法)、火箭电泳法(Laurell法)和反向免疫扩散法,这些方法在《免疫学前沿》(Frontiers in Immunology)等期刊的标准化实验方案中均有详细记载。
琼脂扩散是一种基于抗原与抗体特异性结合的血清学检测技术,其核心是通过半固体琼脂凝胶作为介质,观察可溶性抗原和抗体的扩散及沉淀反应。以下从定义、类型、原理和应用等方面进行详细解释:
琼脂扩散指可溶性抗原和抗体在含有电解质的半固体琼脂凝胶中自由扩散,当两者相遇且比例适当时,形成肉眼可见的白色沉淀线。琼脂在此过程中主要起支撑作用,其高含水量(约99%)允许分子自由移动。沉淀线的形成依赖于抗原抗体的特异性结合,且沉淀线位置固定,可长期保存。
单向琼脂扩散(定量分析):
将抗体预先混合于琼脂中,凝固后打孔加入抗原。抗原扩散时与周围抗体结合,形成环状沉淀线。沉淀环直径与抗原浓度成正比,常用于定量检测(如免疫球蛋白含量测定)。
双向琼脂扩散(定性分析):
抗原和抗体分别加入琼脂板的不同孔中,两者相向扩散,在浓度比例适宜处形成沉淀线。通过沉淀线的数量、形状可判断抗原或抗体的种类及纯度。
结合电泳的扩展方法:
如对流免疫电泳、火箭电泳等,通过电场加速扩散,提升检测灵敏度或效率。
琼脂是从红藻类植物(如石花菜)提取的凝胶剂,在实验中提供稳定的三维网络结构,确保分子扩散的均一性。
通过上述分类和方法,琼脂扩散成为免疫学中经典且实用的技术,兼具操作简便和结果直观的优点。
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