
【机】 equilibrium dialysis
balance; counterpoise; equation; equilibrium; equipoise; poise; standoff
【计】 balancing; equalization
【化】 equilibrium
【医】 balance; bilanz; equilibration; equilibrium
【经】 balancing; counterbalance; equalization; equilibrium; in balance; level
【化】 dialysis
【医】 dialyse; dialysis
dharma; divisor; follow; law; standard
【医】 method
【经】 law
平衡渗析法(Equilibrium Dialysis)是一种基于半透膜分离原理的经典生物物理化学技术,主要用于研究小分子配体(如药物、离子)与大分子(如蛋白质、核酸)之间的相互作用,特别是结合常数、结合位点数目等热力学参数的分析。其核心原理是利用半透膜的选择性通透性,使小分子自由扩散直至膜两侧达到化学平衡,而大分子被限制在膜的一侧。
将实验体系分为两个腔室,中间以半透膜(如纤维素膜)分隔。该膜允许小分子配体(分子量通常<10 kDa)自由通过,但阻挡大分子受体(如蛋白质)。
初始时,一侧腔室加入含大分子的溶液,另一侧为含配体的缓冲液。配体自由扩散,直至膜两侧游离配体浓度相等,此时系统达到热力学平衡。
通过测量平衡后两侧腔室中配体的浓度差,结合总配体浓度,可计算大分子对配体的结合量及结合常数(K~a~)。公式如下:
$$ theta = frac{[L]_b}{[P]_t} = frac{[L]_t - [L]_f}{[P]_t} $$ 其中 $theta$ 为结合分数,$[L]_b$、$[L]_f$ 分别代表结合与游离配体浓度,$[P]_t$ 为大分子总浓度。
定量测定药物与血浆蛋白(如白蛋白)的结合率,评估药物游离浓度,预测药效与毒性。
用于抗体-抗原、激素-受体等相互作用的亲和力检测,是免疫学和分子生物学的基础技术。
分析污染物(如重金属、有机毒物)与生物大分子的结合特性,评估环境风险。
中文 | 英文 |
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平衡渗析法 | Equilibrium Dialysis |
半透膜 | Semi-permeable Membrane |
结合常数 | Binding Constant (K~a~) |
游离配体 | Free Ligand |
参考文献来源:
平衡渗析法(Equilibrium Dialysis)是一种基于半透膜分离原理的实验方法,主要用于研究溶液中不同分子(如蛋白质与小分子)的结合特性。以下是其核心要点:
基本原理
该方法利用半透膜(孔径仅允许小分子通过)将溶液分为两室。大分子(如蛋白质)被限制在一侧,而小分子可自由扩散。当系统达到平衡时,通过检测两侧小分子的浓度差,可计算大分子与小分子的结合常数。
关键应用场景
操作流程
将含大分子的溶液与小分子溶液分别置于膜两侧,静置至平衡后,测量两侧浓度,结合公式计算结合参数(如 $$ K_d = frac{[P][L]}{[PL]} $$,其中 ( K_d ) 为解离常数)。
优势与局限
如需更详细的技术参数或实验案例,可参考权威学术文献。
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