
【化】 dual column chromatography
雙柱色譜法是一種高效液相色譜(HPLC)技術,通過串聯或并聯兩根不同特性的色譜柱,實現對複雜樣品中目标化合物的分離、純化或分析。其核心目的是利用不同色譜柱的互補選擇性,提升分離效率或同時分析多類組分。英文術語為"Dual-Column Chromatography" 或"Tandem Column Chromatography"。
串聯模式(Tandem Mode)
樣品依次通過兩根色譜柱(如反相柱+離子交換柱),第一根柱進行初步分離,第二根柱進一步分離幹擾物,適用于痕量分析或去除基質幹擾。
示例:環境水樣中農藥殘留檢測,通過 ( C_{18} ) 柱預分離後,切換至親水柱去除極性雜質。
并聯模式(Parallel Mode)
兩根色譜柱同時分離不同組分,通過閥切換系統整合數據,提升高通量分析效率。常見于藥物代謝研究中同時分析酸性/堿性化合物。
柱切換技術(Column Switching)
核心是六通閥控制流動相路徑,實現樣品在柱間的定向轉移,避免手動操作誤差,提高自動化水平。
參數 | 建議範圍 | 作用 |
---|---|---|
柱尺寸匹配 | 第一柱内徑 ≤ 第二柱 | 避免峰展寬 |
流速 | 0.5–2.0 mL/min | 平衡柱壓與分離效率 |
柱溫 | 25–40°C | 保持化合物穩定性 |
切換時間 | 依據目标物保留時間優化 | 防止目标組分損失 |
注:實際應用中需根據樣品性質優化柱組合(如 ( C_{18}/HILIC )、陰離子交換/尺寸排阻等),并驗證系統兼容性。
雙柱色譜法(又稱化學抑制型離子色譜法)是離子色譜分析中的一種核心分離技術,其原理和結構特點如下:
雙柱法通過兩根色譜柱(分離柱和抑制柱)協同工作,實現離子的高效分離與檢測。
單柱法(非抑制型)僅用一根分離柱,需依賴低電導淋洗液(如鄰苯二甲酸鹽),但檢測靈敏度通常低于雙柱法。
以陰離子分析中常用的NaOH淋洗液為例,抑制柱中的反應為:
$$
text{NaOH(淋洗液)} + text{H⁺(抑制柱樹脂)} rightarrow text{H₂O} + text{Na⁺(被樹脂吸附)}
$$
此反應将強導電的NaOH轉化為弱導電的水,極大降低背景信號。
總結來說,雙柱法通過分離柱和抑制柱的協同作用,解決了離子色譜中背景幹擾的難題,成為高靈敏度檢測的主流方法。
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