immunoprecipitation是什么意思，immunoprecipitation的意思翻译、用法、同义词、例句

immunoprecipitation英标

英:/''ɪmjʊnəʊprɪ,sɪpɪ'teɪʃən/

常用词典

例句

专业解析

免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）是一种利用抗原与抗体特异性结合的原理，从复杂混合物（如细胞裂解液或血清）中分离富集特定目标蛋白（抗原）及其相互作用分子的生物化学技术。其核心在于抗体作为高度特异的“捕获探针”识别目标蛋白，并通过与固相载体（如琼脂糖珠或磁珠）结合形成复合物，最终通过离心或磁力分离实现目标蛋白的纯化。

技术原理与步骤：

1. 抗体-抗原结合： 将特异性抗体加入含有目标蛋白的样品溶液中，抗体与目标抗原发生高亲和力、高特异性的结合，形成可溶性免疫复合物。
2. 固相捕获： 将预先结合在固相载体（如Protein A/G 琼脂糖珠或磁珠）上的次级抗体（或直接使用结合了Protein A/G的珠子捕获一抗），加入上述免疫复合物溶液中。Protein A/G能特异性结合抗体的Fc段，从而将整个免疫复合物（包含目标抗原）固定在固相载体上。
3. 洗涤： 通过多次洗涤去除未结合或非特异性结合的杂质蛋白、核酸等，仅保留特异性结合在珠子上的目标抗原及其紧密相互作用的分子。
4. 洗脱与分析： 使用变性条件（如SDS-PAGE上样缓冲液加热）或温和条件（如低pH缓冲液、竞争性肽段）将目标抗原及其复合物从固相载体上洗脱下来，随后进行后续分析，如Western blotting（检测目标蛋白）、质谱分析（鉴定相互作用蛋白）、酶活性测定等。

主要应用场景：

• 特定蛋白的富集与检测： 从复杂样本中分离纯化低丰度蛋白，用于Western blotting验证表达或进行定量分析。
• 蛋白相互作用研究： 如免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP），用于鉴定与目标蛋白存在直接或间接相互作用的伴侣蛋白。
• 蛋白复合物纯化： 分离天然状态下的蛋白复合物，用于结构或功能研究。
• 翻译后修饰研究： 富集特定修饰（如磷酸化、泛素化）的蛋白，结合修饰特异性抗体或质谱进行分析。
• 染色质免疫沉淀（ChIP）基础： ChIP技术是IP的一种衍生应用，用于研究蛋白质（如转录因子、组蛋白修饰）与DNA的相互作用。

权威性参考来源：

• Nature Protocols: 提供了详细的免疫沉淀实验步骤指南，涵盖溶液配制、操作流程及注意事项，是实验室操作的经典参考。 https://www.nature.com/articles/nprot.2006.426
• National Center for Biotechnology Information (NCBI) Bookshelf: Alberts 等著的《Molecular Biology of the Cell》是细胞生物学领域的权威教材，其在线版清晰阐述了免疫沉淀的基本原理及其在蛋白相互作用研究中的应用。 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26881/
• Cold Spring Harbor Protocols: 提供标准化的免疫沉淀实验方案，尤其关注Co-IP用于检测蛋白相互作用的细节。 https://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.prot4530

网络扩展资料

immunoprecipitation（免疫沉淀）是生物学中一项基于抗原-抗体特异性结合的重要实验技术，主要用于从复杂混合物中富集目标蛋白或研究分子相互作用。以下是详细解释：

1.定义与发音

• 音标：英音[ˌɪmjʊnəʊprɪsɪpɪˈteɪʃən]，美音[ˌɪmjʊnoʊprɪsɪpɪˈteɪʃən]（）。
• 核心含义：通过抗体特异性捕获溶液中的抗原（如蛋白质），形成复合物并沉淀，从而实现目标分子的分离和分析。

2.原理

免疫沉淀基于抗原与抗体的高亲和力结合。抗体与目标蛋白结合后，通过固相载体（如磁珠）将复合物从溶液中沉淀出来。此过程需在电解质环境中进行，以促进沉淀形成。

3.主要类型

• 直接免疫沉淀（IP）：直接使用目标蛋白的抗体进行富集。
• 共免疫沉淀（Co-IP）：研究蛋白质间相互作用，通过一种蛋白的抗体捕获与其结合的另一种蛋白。
• 染色质免疫沉淀（ChIP）：用于分析DNA与蛋白质的相互作用。

4.应用领域

• 蛋白质互作研究：如信号通路中蛋白复合物的鉴定。
• 疾病机制探索：分析致病蛋白的调控网络。
• 药物靶点验证：确认药物作用的具体蛋白靶点。

5.实验扩展

免疫沉淀常与Western blot、质谱分析联用，进一步鉴定蛋白质的组成或修饰状态。

参考资料

• 权威技术解读可查看网页；
• 基础定义可参考词典来源。

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