immunoprecipitation是什麼意思，immunoprecipitation的意思翻譯、用法、同義詞、例句

immunoprecipitation英标

英:/''ɪmjʊnəʊprɪ,sɪpɪ'teɪʃən/

常用詞典

例句

專業解析

免疫沉澱（Immunoprecipitation, IP）是一種利用抗原與抗體特異性結合的原理，從複雜混合物（如細胞裂解液或血清）中分離富集特定目标蛋白（抗原）及其相互作用分子的生物化學技術。其核心在于抗體作為高度特異的“捕獲探針”識别目标蛋白，并通過與固相載體（如瓊脂糖珠或磁珠）結合形成複合物，最終通過離心或磁力分離實現目标蛋白的純化。

技術原理與步驟：

1. 抗體-抗原結合： 将特異性抗體加入含有目标蛋白的樣品溶液中，抗體與目标抗原發生高親和力、高特異性的結合，形成可溶性免疫複合物。
2. 固相捕獲： 将預先結合在固相載體（如Protein A/G 瓊脂糖珠或磁珠）上的次級抗體（或直接使用結合了Protein A/G的珠子捕獲一抗），加入上述免疫複合物溶液中。Protein A/G能特異性結合抗體的Fc段，從而将整個免疫複合物（包含目标抗原）固定在固相載體上。
3. 洗滌： 通過多次洗滌去除未結合或非特異性結合的雜質蛋白、核酸等，僅保留特異性結合在珠子上的目标抗原及其緊密相互作用的分子。
4. 洗脫與分析： 使用變性條件（如SDS-PAGE上樣緩沖液加熱）或溫和條件（如低pH緩沖液、競争性肽段）将目标抗原及其複合物從固相載體上洗脫下來，隨後進行後續分析，如Western blotting（檢測目标蛋白）、質譜分析（鑒定相互作用蛋白）、酶活性測定等。

主要應用場景：

• 特定蛋白的富集與檢測： 從複雜樣本中分離純化低豐度蛋白，用于Western blotting驗證表達或進行定量分析。
• 蛋白相互作用研究： 如免疫共沉澱（Co-Immunoprecipitation, Co-IP），用于鑒定與目标蛋白存在直接或間接相互作用的伴侶蛋白。
• 蛋白複合物純化： 分離天然狀态下的蛋白複合物，用于結構或功能研究。
• 翻譯後修飾研究： 富集特定修飾（如磷酸化、泛素化）的蛋白，結合修飾特異性抗體或質譜進行分析。
• 染色質免疫沉澱（ChIP）基礎： ChIP技術是IP的一種衍生應用，用于研究蛋白質（如轉錄因子、組蛋白修飾）與DNA的相互作用。

權威性參考來源：

• Nature Protocols: 提供了詳細的免疫沉澱實驗步驟指南，涵蓋溶液配制、操作流程及注意事項，是實驗室操作的經典參考。 https://www.nature.com/articles/nprot.2006.426
• National Center for Biotechnology Information (NCBI) Bookshelf: Alberts 等著的《Molecular Biology of the Cell》是細胞生物學領域的權威教材，其線上版清晰闡述了免疫沉澱的基本原理及其在蛋白相互作用研究中的應用。 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26881/
• Cold Spring Harbor Protocols: 提供标準化的免疫沉澱實驗方案，尤其關注Co-IP用于檢測蛋白相互作用的細節。 https://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.prot4530

網絡擴展資料

immunoprecipitation（免疫沉澱）是生物學中一項基于抗原-抗體特異性結合的重要實驗技術，主要用于從複雜混合物中富集目标蛋白或研究分子相互作用。以下是詳細解釋：

1.定義與發音

• 音标：英音[ˌɪmjʊnəʊprɪsɪpɪˈteɪʃən]，美音[ˌɪmjʊnoʊprɪsɪpɪˈteɪʃən]（）。
• 核心含義：通過抗體特異性捕獲溶液中的抗原（如蛋白質），形成複合物并沉澱，從而實現目标分子的分離和分析。

2.原理

免疫沉澱基于抗原與抗體的高親和力結合。抗體與目标蛋白結合後，通過固相載體（如磁珠）将複合物從溶液中沉澱出來。此過程需在電解質環境中進行，以促進沉澱形成。

3.主要類型

• 直接免疫沉澱（IP）：直接使用目标蛋白的抗體進行富集。
• 共免疫沉澱（Co-IP）：研究蛋白質間相互作用，通過一種蛋白的抗體捕獲與其結合的另一種蛋白。
• 染色質免疫沉澱（ChIP）：用于分析DNA與蛋白質的相互作用。

4.應用領域

• 蛋白質互作研究：如信號通路中蛋白複合物的鑒定。
• 疾病機制探索：分析緻病蛋白的調控網絡。
• 藥物靶點驗證：确認藥物作用的具體蛋白靶點。

5.實驗擴展

免疫沉澱常與Western blot、質譜分析聯用，進一步鑒定蛋白質的組成或修飾狀态。

參考資料

• 權威技術解讀可查看網頁；
• 基礎定義可參考詞典來源。

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