positional cloning是什么意思，positional cloning的意思翻译、用法、同义词、例句

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专业解析

定位克隆（positional cloning）是遗传学领域用于识别和分离特定性状相关基因的核心技术，其通过基因在染色体上的物理位置信息实现目标基因的精准定位与克隆。该方法不依赖基因功能或产物的先验知识，主要应用于人类疾病相关基因的发现。

技术原理与步骤

1. 遗传连锁分析：通过家系研究或群体分析，利用分子标记（如SNP）确定目标基因与已知遗传标记的共分离关系，将基因定位到特定染色体区间（《自然》杂志）。
2. 物理图谱构建：运用限制性内切酶图谱、染色体步移等技术建立包含候选区域的连续DNA片段重叠群（contig），美国国家生物技术信息中心（NCBI）数据库收录了多种生物的物理图谱数据。
3. 候选基因筛选：在目标区域内通过外显子预测、表达谱分析等手段筛选潜在致病基因，例如囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）基因即通过此方法发现（《新英格兰医学杂志》基因诊断专刊）。

应用价值

该方法成功鉴定了亨廷顿舞蹈症（Huntington's disease）的HTT基因和杜氏肌营养不良症（DMD）的dystrophin基因，为遗传病机制研究提供了分子基础。国际人类基因组计划将定位克隆列为基因发现三大支柱技术之一（人类基因组白皮书技术报告）。

技术演进

随着二代测序技术发展，定位克隆已与全基因组关联分析（GWAS）相结合，形成现代基因定位的标准流程（《细胞》杂志基因编辑综述）。

网络扩展资料

Positional Cloning（定位克隆）是一种基于基因在染色体上的位置进行克隆的分子生物学技术，主要用于分离和鉴定未知功能或序列的基因。以下是详细解释：

1.定义与核心原理

• 定义：Positional cloning又称图位克隆（Map-based cloning），指通过基因在染色体上的物理位置信息，结合遗传标记和分子生物学技术，逐步缩小候选区域并最终克隆目标基因的方法。
• 核心：无需预先知道基因的DNA序列或表达产物信息，而是依赖遗传连锁分析和物理图谱构建。

2.技术特点

• 适用条件：
  • 需建立遗传分离群体（如F₂、DH、BC等），用于基因定位。
  • 需通过分子标记（如SNP、SSR）确定目标基因的染色体区域。
• 关键步骤：
  1. 基因定位：利用遗传标记确定基因所在的染色体区间。
  2. 物理图谱构建：通过筛选基因组文库（如BAC文库），构建目标区域的连续DNA片段重叠群。
  3. 染色体步行/登陆：通过逐步缩小候选区域或直接筛选包含目标基因的克隆。
  4. 功能验证：通过遗传转化或互补实验确认基因功能。

3.应用场景

• 主要用于分离功能未知的基因，如疾病相关基因、植物抗病基因等。
• 典型案例包括囊性纤维化基因（CFTR）和亨廷顿病基因的克隆。

4.与其他克隆技术的区别

• 不同于功能克隆（基于已知蛋白质序列设计探针筛选基因），定位克隆完全依赖基因的染色体位置信息。

参考来源：如需完整信息，可查看相关分子生物学教材或基因克隆技术综述文献。

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