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isoelectric focusing是什么意思,isoelectric focusing的意思翻译、用法、同义词、例句

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常用词典

  • [生化] 等电点聚焦

  • 例句

  • Isoelectric focusing may be used as another indication.

    等电聚焦可以用为另一指标。

  • Haemoglobin polymorphism of Chinese miniature horses was examined by agarose gel isoelectric focusing.

    采用等电聚焦电泳对中国矮马进行了血红蛋白多态性的检测。

  • The results showed that low ion intensity sample washing buffer improved the performance of isoelectric focusing.

    结果表明:采用低离子强度的缓冲液冲洗收集样品可以提高等电聚焦效果。

  • After quantification, the protein samples were separated by isoelectric focusing electrophoresis and then by SDS-PAGE.

    定量后,分别进行一维等电聚焦分离和二维聚************凝胶电泳分离。

  • Isoelectric focusing of STFC in thin-layer polyacrylamide gel obtained only one band as shown by Coomassie Blue staining.

    在等电点聚焦分析中该成分为一条考马斯亮蓝染色带。

  • 专业解析

    等电聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)是一种高分辨率的电泳技术,用于根据蛋白质或其他两性分子的等电点(pI)进行分离。其核心原理是:在具有稳定pH梯度的介质(如聚丙烯酰胺凝胶)中施加电场,带电分子将迁移至其净电荷为零的pH位置(即等电点),并在该点聚焦形成窄带,从而实现精确分离。

    一、核心原理与机制

    1. pH梯度形成

      通过两性电解质载体(如Ampholine或Pharmalyte)在电场作用下形成从阳极(低pH)到阴极(高pH)的线性pH梯度。两性电解质本身具有不同pI值,在电场中迁移至各自等电点并稳定维持梯度 。

    2. 分子迁移与聚焦

      带电分子在pH梯度中迁移:若所处环境pH < pI,分子带正电,向阳极移动;若pH > pI,分子带负电,向阴极移动。最终在pH = pI处停止迁移,实现聚焦 。

    3. 分辨率优势

      扩散效应被电场力抵消,即使电荷差异极小的分子(如pI相差0.01单位)也能分离,分辨率显著高于常规电泳 。

    二、关键应用领域

    1. 蛋白质组学研究

      作为双向电泳(2D-PAGE)的第一维步骤,分离复杂蛋白质混合物,为质谱分析提供基础 。

    2. 临床诊断

      检测血红蛋白变异体(如镰状细胞贫血)、同工酶谱分析等,辅助疾病诊断 。

    3. 生物制药质量控制

      分析单克隆抗体的电荷异质性(如脱酰胺化修饰),确保药物批间一致性 。

    三、技术操作要点

    1. 介质选择

      常用聚丙烯酰胺凝胶或固定化pH梯度胶(IPG胶条),后者梯度更稳定,重复性更佳 。

    2. 电场条件

      需恒定高电压(通常1500-3500 V),低温运行以防止焦耳热导致蛋白变性 。

    3. 染色与检测

      聚焦后通过考马斯亮蓝、银染或荧光染色可视化蛋白条带,或转印至膜进行免疫检测 。

    权威参考文献

    1. 原理与基础

      Righetti, P.G. (2005). Isoelectric Focusing: Theory, Methodology and Applications. Elsevier.

    2. 蛋白质组学应用

      Görg, A., et al. (2004). "Current two-dimensional electrophoresis technology for proteomics." Proteomics, 4(12): 3665-3685.

    3. 生物制药分析

      Fekete, S., et al. (2015). "Analytical strategies for the characterization of therapeutic monoclonal antibodies." Trends in Analytical Chemistry, 71: 91-102.

    注:因搜索结果未提供可直接引用的网页链接,以上参考文献为学术出版物,可通过DOI在PubMed或ScienceDirect等平台检索原文。

    网络扩展资料

    Isoelectric Focusing(等电聚焦) 是一种基于蛋白质等电点差异进行分离的电泳技术,主要用于生物化学和分子生物学领域。以下是详细解释:

    1.定义与原理

    2.技术优势

    3.应用场景

    4.相关技术扩展

    如需进一步了解操作步骤或具体案例,可参考生物化学实验手册或专业文献来源。

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