
[生化] 等电点聚焦
Isoelectric focusing may be used as another indication.
等电聚焦可以用为另一指标。
Haemoglobin polymorphism of Chinese miniature horses was examined by agarose gel isoelectric focusing.
采用等电聚焦电泳对中国矮马进行了血红蛋白多态性的检测。
The results showed that low ion intensity sample washing buffer improved the performance of isoelectric focusing.
结果表明:采用低离子强度的缓冲液冲洗收集样品可以提高等电聚焦效果。
After quantification, the protein samples were separated by isoelectric focusing electrophoresis and then by SDS-PAGE.
定量后,分别进行一维等电聚焦分离和二维聚************凝胶电泳分离。
Isoelectric focusing of STFC in thin-layer polyacrylamide gel obtained only one band as shown by Coomassie Blue staining.
在等电点聚焦分析中该成分为一条考马斯亮蓝染色带。
等电聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)是一种高分辨率的电泳技术,用于根据蛋白质或其他两性分子的等电点(pI)进行分离。其核心原理是:在具有稳定pH梯度的介质(如聚丙烯酰胺凝胶)中施加电场,带电分子将迁移至其净电荷为零的pH位置(即等电点),并在该点聚焦形成窄带,从而实现精确分离。
通过两性电解质载体(如Ampholine或Pharmalyte)在电场作用下形成从阳极(低pH)到阴极(高pH)的线性pH梯度。两性电解质本身具有不同pI值,在电场中迁移至各自等电点并稳定维持梯度 。
带电分子在pH梯度中迁移:若所处环境pH < pI,分子带正电,向阳极移动;若pH > pI,分子带负电,向阴极移动。最终在pH = pI处停止迁移,实现聚焦 。
扩散效应被电场力抵消,即使电荷差异极小的分子(如pI相差0.01单位)也能分离,分辨率显著高于常规电泳 。
作为双向电泳(2D-PAGE)的第一维步骤,分离复杂蛋白质混合物,为质谱分析提供基础 。
检测血红蛋白变异体(如镰状细胞贫血)、同工酶谱分析等,辅助疾病诊断 。
分析单克隆抗体的电荷异质性(如脱酰胺化修饰),确保药物批间一致性 。
常用聚丙烯酰胺凝胶或固定化pH梯度胶(IPG胶条),后者梯度更稳定,重复性更佳 。
需恒定高电压(通常1500-3500 V),低温运行以防止焦耳热导致蛋白变性 。
聚焦后通过考马斯亮蓝、银染或荧光染色可视化蛋白条带,或转印至膜进行免疫检测 。
Righetti, P.G. (2005). Isoelectric Focusing: Theory, Methodology and Applications. Elsevier.
Görg, A., et al. (2004). "Current two-dimensional electrophoresis technology for proteomics." Proteomics, 4(12): 3665-3685.
Fekete, S., et al. (2015). "Analytical strategies for the characterization of therapeutic monoclonal antibodies." Trends in Analytical Chemistry, 71: 91-102.
注:因搜索结果未提供可直接引用的网页链接,以上参考文献为学术出版物,可通过DOI在PubMed或ScienceDirect等平台检索原文。
Isoelectric Focusing(等电聚焦) 是一种基于蛋白质等电点差异进行分离的电泳技术,主要用于生物化学和分子生物学领域。以下是详细解释:
如需进一步了解操作步骤或具体案例,可参考生物化学实验手册或专业文献来源。
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